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目的核糖核苷酸还原酶(Ribonucleotide reductase,RR)是细胞内DNA复制和损伤修复中的限速酶,在细胞增殖以及肿瘤增殖和浸润转移中起着重要作用。宫颈癌在女性高发恶性肿瘤中位于第二位,化疗是宫颈癌治疗的一种重要手段。RR是一些抗肿瘤药物的作用靶点,吉西他滨(Gemcitabine,GEM)是目前最有效且应用最广泛的RR抑制剂。本研究通过检测宫颈癌组织和细胞中RR酶活性及亚基表达水平,探讨RR在宫颈癌发生、发展的可能作用;进一步研究吉西他滨与卡铂(Carboplatin, CBDCA)联合用药对宫颈癌细胞的作用效果。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western Blotting和CDP还原法分别检测宫颈癌组织及癌旁正常组织中RR亚基表达及酶活性,CCK-8法检测宫颈癌细胞系SiHa、CaSki对GEM、CBDCA单药及合药的敏感性,EdU法检测GEM对宫颈癌细胞DNA合成的影响,Western Blotting和免疫荧光两种方法检测药物对宫颈癌细胞的DNA损伤作用,流式细胞仪检测GEM、CBDCA单药及合药时细胞凋亡情况,并基于Chou-Talalay法计算合用指数(CI)以分析GEM与CBDCA合用对宫颈癌细胞是否具有协同作用。结果宫颈癌组织中的RRM1和RRM2mRNA水平较癌旁正常组织中的表达水平明显升高(P<0.0001),类似地,RR酶活和亚基蛋白表达水平在宫颈癌组织中的水平也上调。GEM能抑制宫颈癌细胞DNA合成,CBDCA能诱导DNA损伤,GEM与CBDCA联合作用对宫颈癌细胞具有协同毒性作用(log10[CI]<0),GEM与CBDCA合用能促进诱导宫颈癌细胞DNA损伤产生和促进细胞凋亡率增加。结论核糖核苷酸还原酶在宫颈癌中的表达上调,细胞实验表明RR抑制剂GEM与宫颈癌一线化疗药物CBDCA合用对宫颈癌细胞产生协同毒性作用,协同作用是通过抑制DNA合成和促进细胞凋亡产生的。本研究可能为GEM联合CBDCA在宫颈癌的临床治疗应用提供实验依据。