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第一部分染料木黄酮对小细胞肺癌H446细胞生长与迁移能力的影响目的：小细胞肺癌约占新诊断肺癌总数的15%-20%,其恶性程度高,增值快,生长迅速,转移早,5年生存率低,迫切需要新的治疗手段和靶点。染料木黄酮(genistein)是最重要的大豆异黄酮之一,对多种肿瘤有预防及治疗作用,然而它在小细胞肺癌中的作用尚不清楚。本实验旨在研究genistein在小细胞肺癌H446细胞中对细胞生长和迁移能力的影响,以明确genistein在小细胞肺癌中的抗肿瘤作用。方法：利用不同浓度的genistein处理H446细胞,采用CCK-8法检测genistein对H446细胞增殖能力的影响,流式细胞术分析genistein对H446细胞凋亡及细胞周期的影响,应用划痕实验检测细胞迁移能力的改变。结果：H446细胞经不同浓度(0、10、25、50、75、100μmol/L)的genistein分别作用24、48、72h后,CCK-8法检测细胞增殖能力,结果显示细胞增殖受到明显抑制,且随着genistein浓度的升高及培养时间的延长,细胞增殖抑制愈明显；流式细胞术检测经不同浓度genistein处理后,H446细胞凋亡率的变化,结果发现经genistein作用72h后,细胞凋亡率随genistein浓度升高逐渐上升,DMSO对照组、25μmol/L、5μmol/L及75μmol/L组的凋亡率分别为4.8%±0.8%、12.5%±2.0%、44.5%±3.7%和54.9%±2.9%(P<0.05)；流式细胞术检测细胞周期变化,发现H446的G2/M期细胞比例由对照组的21.9%±3.3%增加至40.4%±1.6%(25μM)、61.9%±2.7%(50μM)、72.9%±4.3%(75μM),而G1及S期细胞数逐渐降低,细胞阻滞于G2/M期(P<0.05),即genistein可诱导H446细胞发生G2/M期细胞周期阻滞,细胞增殖受抑；划痕实验显示经genistein处理48h后,H446细胞划痕修复速率明显下降,说明genistein可明显抵制H446细胞的迁移能力。结论：Genistein引起H446细胞发生与药物浓度相关的增殖抑制、凋亡增加、G2/M期细胞周期阻滞和细胞迁移能力下降,有可能成为新的有效的抗小细胞肺癌药物。第二部分Genistein在小细胞肺癌H446细胞中发挥抗肿瘤作用的分子机制目的：探讨genistein在小细胞肺癌H446中发挥抗肿瘤作用的分子机制。方法：Western blot及Real-time PCR检测经genistein处理后H446细胞中FoxM1基因及其下游靶基因农达的变化；FoxM1表达质粒转染H446细胞,采用CCK-8法检测FoxM1过表达前后,genistein抑制细胞增殖能力的变化。结果：经genistein作用72h后,Real-time PCR实验检测H446细胞中FoxM1靶基因cyclin B1、cdc25B、survivin、p21表达情况,结果显示随genistein浓度升高，cyclin B、cdc25B、survivin表达逐渐下降,p21农达逐渐增加；Western blot实验进一步证实FoxM1及其靶蛋白cyclinB1出现与genistein浓度相关的表达下降、p21表达增加。上述结果显示genistein可抵制FoxM1信号通路活性；该研究利用FoxM1cDNA转染H446细胞以促进FoxM1过表达,结果发现IFoxM1表达上调后,genistein对H446细胞增殖抵制作用明显减弱(?)(55.6%±8.8%) vs(29.6%±5.0%),P<0.05],说明FoxM1过表达可部分拮抗genistein的抗肿瘤增殖作用。结论：Genistein在小细胞肺(?)H446细胞中通过抑制FoxM1通路活性发挥抗肿瘤作用。