[目 的]诺如病毒（NoV,Norovirus）是属于杯状病毒科诺如病毒属的一种肠道病毒,是造成急性传染性胃肠炎（AGE,Acute infectious gastroenteritis）的主要病因之一,其可以通过人与人之间的接触及被污染的食源或水源进行传播。老年人及儿童为易感人群,感染者的主要临床症状为腹泻或呕吐,该疾病在全球范围内广泛流行从而对世界卫生健康造成了极大的经济负担。诺如病毒基因组变异较快,目前尚无上市的疫苗用于预防。研发中的疫苗具有产量低及免疫原性弱等难点,马克斯克鲁维酵母表达系统是一种新型酵母系统,其耐高温且产量高。因此本研究的目的为:利用马克斯克鲁维酵母制备流行株GII.17诺如病毒病毒样颗粒（VLPs,Virus-like particles）,并能为评价疫苗的免疫原性提供一定的基础。[方 法]（1）将筛选出的GII.17型诺如病毒流行株（KR020503.1）VP1序列进行马克斯克鲁维酵母密码子优化后连接到载体PUKDN 115上;（2）将重组载体通过醋酸锂转化法转入到马克斯克鲁维酵母中,筛选重组单克隆;（3）对单克隆进行摇床培养,收获菌体后对蛋白进行纯化;（4）将纯化的蛋白（5μg-50μg）与佐剂混匀后腹腔注射BALB/c小鼠,通过抗体水平、抗体滴度、抗体阻断能力及脾细胞增殖情况评价免疫原性。[结 果]（1）获得重组单克隆并在马克斯克鲁维酵母中表达出GII.17型诺如病毒病毒样颗粒,在电镜下可明显观察到具有病毒样颗粒特征的圆形颗粒,直径约35nm;（2）通过Q柱及分子筛联合纯化可得到纯度较高的病毒样颗粒,产量可达0.26g/L;（3）使用病毒样颗粒免疫小鼠的结果显示该病毒样颗粒可有效诱导小鼠的免疫反应。在抗体水平方面,0、2、4、6周的小鼠抗体水平是逐步增加的,6周与8周抗体水平相当,添加铝佐剂组（抗原+100μg Al（OH）3）比未添加佐剂组在数值上更为集中,误差较小,结果显示较小的抗原量（5μg）可诱导较强的免疫反应水平,且超过一定抗原量后增大抗原量,免疫反应水平无显著性差异;抗体滴度方面,2、4、6周小鼠抗体滴度逐步增加,最高滴度可达到602249,8周抗体滴度相较6周有所下降,但仍保持一定的高水平,添加佐剂组（抗原+100μg Al（OH）3）的数据误差更小且集中,结果显示到第8周时较小的抗原量（5μg）所诱导的抗体滴度与较高抗原量（10μg、25μg、50μg）所诱导的抗体滴度相比无显著性差异（P≥0.05）;抗体阻断能力方面,结果显示第8周抗体阻断能力与第6周水平相差不大,BT50最高可达到1056,第6周血清抗体阻断能力最强的为10μg抗原组,第8周添加佐剂各实验组间的结果虽然无显著性差异（P≥0.05）,但是血清抗体阻断能力最强的仍为10μg抗原组,提示中低剂量组（10μg）能较好地诱导血清阻断抗体,且在同一组中未添加铝佐剂组比添加佐剂组的抗体阻断要低,提示添加佐剂对诱导体液免疫有较大的影响;（4）脾细胞增殖实验结果显示实验组（加入1μg VLPs）较对照组（不做任何处理）的刺激指数（SI,Stimulation Index）更高,说明脾淋巴细胞能够进行快增殖,提示该病毒样颗粒除诱导体液免疫外,也可诱导一定的细胞免疫。[结 论]（1）获得高纯度的GII.17型诺如病毒病毒样颗粒;（2）GII.17型诺如病毒病毒样颗粒可作为具有开发潜能的实验性疫苗;（3）马克斯克鲁维酵母可作为产生外源病毒蛋白的重要平台之一,其培养方法简单且可获得高产量的蛋白。