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目的脊柱骨折的患者常并发棘上韧带、棘间韧带损伤。但是韧带损伤后不愈合或瘢痕愈合,常导致明显的关节功能丧失和疼痛。而且尽管韧带损伤后可以自愈,但愈合后韧带的超微结构及生化构成发生了很大改变,即使在韧带愈合后若干年内,其生物力学特性仍较正常韧带差。近年来国内外的学者尝试采用生物学的方法来促进韧带的愈合。其主要方法有细胞因子治疗、基因治疗和组织工程方法等。骨髓间充质干细胞（Mesenchymal stem cells,MSCs）.作为干细胞的一种,具有多方向分化的潜能。本实验以MSCs为种子细胞,用组织工程的方法来促进韧带的愈合。观察该方法促进大鼠棘上、棘间韧带损伤愈合的效果。方法一、MSCs的体外培养利用密度梯度离心法分离获取大鼠股骨MSCs。以2.0×105/mL的密度接种于DMEM培养液中。原代细胞增殖达到铺满瓶底约80%时,按1:3比例进行传代。二、细胞—胶原海绵复合体的制备在第三代细胞的培养液中加入3mg/L BrdU培养24小时予以标记。然后用胰蛋白酶消化,并制成细胞悬液,用DMEM培养液稀释成10×106/mL的浓度,将其滴到已用紫外线消毒的胶原海绵上,5%CO2孵育箱中37℃恒温培养24小时,使细胞吸附于胶原海绵上制成细胞—胶原海绵复合体。三、动物模型的建立切断大鼠L4—L5间的棘上、棘间韧带。实验组将细胞—胶原海绵复合体移植于损伤处,对照组仅移植以胶原海绵。四、HE染色于移植后第4周处死动物,切取标本,作组织学检查。每个标本选取一张切片进行HE染色。五、免疫组化染色再次选取每个标本的切片,做免疫组化染色。胞核棕黄色者为阳性染色细胞。结果一、MSCs的体外培养倒置显微镜下观察可见,MSCs接种3天后即有部分细胞贴壁。培养12-14天细胞生长成单层。传代后,MSCs增殖明显加快9-10天既可融合成单层。二、动物模型结果20只动物均存活良好。三、组织学观察结果实验组术后4周可见6例移植处形成韧带样组织,可见形态一致、排列方向与正常组织接近的成纤维细胞,类似正常韧带组织。对照组所形成的新生组织含较多脂肪组织且细胞排列紊乱,胶原纤维呈松散网丝状。两组间愈合较优者所占比率的差异具有显著性（P＜0.05）。四、免疫组化结果于实验组切片可见胞核为棕褐色的阳性细胞。对照组未见阳性染色细胞。讨论MSCs为较为理想的种子细胞。使用Ⅰ型胶原作为载体也较为合理。修复损伤韧带的部分组织来源于移植的MSCs。MSCs在不添加外源性生长因子的情况下,可在体内对韧带缺损进行有效修复。实验组韧带恢复较好,对照组恢复的相对较差。结论应用组织工程技术以MSCs修复棘上、棘间韧带损伤具有可行性。该方法可以促进韧带的愈合,其愈合效果好于韧带自然愈合的效果。