力学载荷下骨细胞的生物学响应与差异表达microRNAs研究

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目的:我们前期研究发现2500με、0.5 Hz的周期性力学载荷,持续8 h可以促进成骨细胞的增殖与分化,本研究旨在探索骨细胞是否也响应这种力学环境、这种力学环境下是否存在骨细胞力学响应分子。方法:利用四点弯曲力学加载装置,向培养至融合状态的骨细胞-MLO-Y4施加2500με、0.5 Hz的周期性力学载荷,持续8 h;ELISA法检测胰岛素样生长因子-1(Insulin-like Growth Factor-1,IGF-1)、前列腺素E2(Prostaglandin E2,PGE-2);Western blot检测硬骨素(Sclerostin,SOST);生化法检测一氧化氮合酶(Nitric Oxide Synthase)活力;芯片检测差异表达micro RNA,q RT-PCR验证差异表达micro RNA。结果:相较于对照组,力学载荷组的IGF-1、PGE-2、SOST表达量和NOS活力均上调(*P<0.05),其中诱导型NOS活力上调最明显(**P<0.01);芯片筛选后mi RNA定量验证差异显著的40个mi RNA发现13个mi RNAs上调,3个mi RNAs下调,与芯片筛选结果相符。结论:1、在本研究里,向骨细胞-MLO-Y4施加2500με、0.5 Hz的周期性力学载荷,持续8 h后,IGF-1、PGE-2、SOST表达量和NOS活力均上调,提示骨细胞也响应这种方式的力学载荷;2、骨细胞通过旁分泌途径调节成骨细胞或破骨细胞的活性,以调节骨重建,这几个因子在骨细胞通过旁分泌途径发挥调节功能过程中很可能有重要作用;3、这16个micro RNA都是力学响应micro RNA,很可能在骨重建与修复中发挥着重要的功能。
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