细胞表面糖蛋白作为细胞膜的主要成分之一，被认为是肿瘤发生和发展过程中的重要识别分子。肿瘤细胞与正常细胞相比，具有更强的侵入性，且具备破坏正常组织的能力，这与细胞膜糖蛋白糖链的改变密切相关。　　 本研究合成了非天然单糖1，3，4，6-O-乙酰-N-叠氮乙酰甘露糖胺（Ac4ManNAz）及两种炔基探针Biotin-SS-Alkyne、Biotin-LC-Alkyne，利用AcManNAz进行细胞代谢标记，确定最佳代谢条件。依据点击化学“叠氮化物-炔烃环加成反应”的原理，使标记细胞显色，利用激光共聚焦显微镜进行观察，可在细胞膜上检测到代谢标记糖蛋白的强烈荧光信号，从而证明代谢标记与检测体系具有较高的特异性。依靠生物素-亲和素的结合活性，对代谢标记Ac4ManNAz的细胞表面糖蛋白进行提取分离，经SDS-PAGE鉴定，该方法可专一性地提取代谢标记的细胞表面糖蛋白，经二维电泳分离，蛋白表现出糖蛋白特征性图谱，可进行单一蛋白质谱鉴定，以用于糖蛋白组学的研究。　　 随后，本研究利用建立的细胞表面糖蛋白标记和分离方法，对小鼠肺腺癌细胞LA795进行代谢标记与糖蛋白分离，再使之与量子点偶联，通过活体成像，观测标记蛋白24h内体内转移情况，发现偶联糖蛋白的量子点均迁移到小鼠颈部淋巴结，在活体水平上证明了肿瘤表面糖蛋白的抗原特性。随后，以小鼠胚胎成纤维细胞NIH-3T3为受体，建立NF-κB反应性的双荧光素酶报告基因检测系统，将提取蛋白作用于该系统，细胞内产生明显NF-κB活性，从而在细胞水平上再次证明了肿瘤表面糖蛋白的免疫原性。即在活体和细胞水平均证实了肿瘤表面糖蛋白是机体免疫系统识别的重要基础之一。　　 综上所述，本研究成功建立了细胞代谢标记方法与膜糖蛋白提取方法，并证实了肿瘤表面糖蛋白作为肿瘤细胞特异性抗原，在机体内能被免疫系统识别的特性，这为肿瘤疫苗和抗肿瘤药物的研发提供了一个新的途径，同时也为肿瘤免疫学的研究奠定了一定的基础。