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鼻咽癌放射治疗后的局部复发和远处转移是病人死亡的主要原因之一。本实验观察研究姜黄素对人鼻咽癌细胞系(CNE-2Z)经放射处理后存活的，具有放射抵抗潜能的细胞CNE-2Z-Tr12(以下简称Tr12)增殖、侵袭、运动及凋亡的影响，并探讨其作用的可能机制，为姜黄素在鼻咽癌放射增敏和放疗后复发的鼻咽癌治疗中的应用提供体外试验依据。
[方法]人鼻咽癌细胞系CNE-2Z经放射线处理后继续培养获得放射残存细胞Tr12，PCR检测其线粒体DNA4977bp有无缺失；RT-PCR检测其EGFRmRNA的表达情况。体外培养的Tr12细胞经不同剂量姜黄素处理后，用MTT法观察对细胞增殖的抑制，流式细胞术检测细胞周期和凋亡率的改变，采用考马氏亮蓝R-250染色光镜下观察姜黄素处理对Tr12的细胞骨架的作用；扫描电镜观察姜黄素处理后细胞表面形态结构、凋亡及坏死的形态；体外侵袭、运动实验检测姜黄素对Tr12细胞侵袭、运动能力的影响；RT-PCR检测姜黄素处理后Tr12细胞EGFRmRNA的表达；Western-blot检测姜黄素处理后Tr12细胞凋亡抑制基因bcl-2表达。
[结果]
(1)Tr12及其母系CNE-2Z的线粒体DNA4977bp均未被证实缺失突变。(2)Tr12细胞EGFRmRNA表达增高，与母系CNE-2Z比较，差异有显著性(P＜0.01)。(3)姜黄素对Tr12细胞的生长和增殖都具有一定程度的抑制作用，阻断细胞于S期和G2/M期。(4)姜黄素处理后Tr12细胞侵袭、运动能力减弱，并成剂量依赖性。(5)姜黄素处理后扫描电镜观察，细胞表面微绒毛明显缩短、减少。(6)姜黄素处理后Tr12的细胞骨架稀疏，应力纤维减少。(7)姜黄素处理后Tr12细胞EGFRmRNA表达减少，差异有显著性(P＜0.01)。(8)姜黄素处理后扫描电镜观察，可见凋亡小体，有坏死细胞出现，都随剂量增加而增多。(9)姜黄素处理后Tr12细胞凋亡率增加，并呈剂量效应关系。(10)姜黄素处理后Tr12细胞凋亡抑制基因BCL-2蛋白表达减少。
[结论]
(1)细胞线粒体DNA4977bp片断缺失可能是细胞辐射后的生物学标志之一，Tr12细胞可能不存在缺失；(2)Tr12细胞辐射抗性增强，这可能与EGFR表达增高有关；(3)姜黄素可以有效抑制Tr12细胞的生长和增殖，具有明显的量效关系，细胞周期的阻滞可能是其影响因素之一；(4)姜黄素可以有效抑制抑制Tr12细胞的侵袭、运动，这可能与姜黄素对细胞微绒毛、细胞骨架的影响及EGFR表达降低有关；(5)姜黄素可以诱导Tr12细胞的凋亡，可能与其可以从蛋白水平抑制Tr12细胞BCL-2的表达有关。