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目的:采用肾移植技术,建立大鼠肾缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)模型,检测坏死性凋亡关键信号因子受体相互作用蛋白激酶1(receptor-interacting protein kinase 1,RIP-1)、受体相互作用蛋白激酶3(receptor-interacting protein kinase3,RIP-3)在大鼠肾移植后缺血再灌注肾组织中的表达变化,同时观察高压氧(hyperbaric oxygenation,HBO)治疗对RIP-1、RIP-3表达的影响,探索坏死性凋亡在肾IRI发生中的作用以及HBO治疗对坏死性凋亡的作用。方法:课题组前期工作已建立了SD大鼠→SD大鼠的肾移植模型,分为假手术组、肾移植组以及肾移植﹢HBO治疗组(简称HBO治疗组),每组又以1h、3h和5h分为三小组。其中肾移植组仅行肾移植手术,HBO治疗组在肾移植术后分别于0h、2h和4h置于高压氧舱治疗1h,而假手术组仅行右肾切除术后关闭腹腔,且不予高压氧治疗。肾移植组及HBO治疗组分别于术后1h、3h和5h时切除移植肾并处死大鼠,假手术组于术后1h、3h和5h时切除左肾后处死大鼠。本研究采用项目组前期工作制备的石蜡组织块进行切片,通过HE染色观察病理改变,同时运用免疫组织化学法检测肾组织中RIP-1、RIP-3蛋白的表达。结果:1.HE染色病理变化:在假手术组各时间点肾的组织结构基本正常。肾移植后肾小管管腔扩张,肾小球体积增大,上皮细胞明显肿胀,部分组织呈现颗粒样变性,并出现蛋白样管型及中性粒细胞浸润,随着时间延长损伤越严重。HBO治疗后同样有不同程度的肾小管管腔扩张、肾小球体积增大、上皮细胞肿胀变形,但病变程度不及肾移植组,仅有少量中性粒细胞浸润和颗粒样变性,组织损伤较肾移植组减轻。2.大鼠肾组织RIP-1、RIP-3的表达变化:RIP-1和RIP-3都主要表达于肾小管上皮细胞的胞浆,RIP-1在肾小球无明显表达,RIP-3在肾小球少量表达。相对定量分析显示:在1h、3h、5h各时间点肾移植组二者的表达量均明显高于假手术组(P<0.05),HBO治疗后二者的表达量则明显降低(P<0.05),但仍高于假手术组(P<0.05)。在肾移植组和HBO治疗组,随再灌注时间的延长,二者的表达量逐渐升高(P<0.05),以再灌注5h时升高最明显(P<0.05);在假手术组,各时间点二者的表达量无显著差异(P>0.05)。结论:1.肾移植术后早期即出现了肾组织破坏,移植肾再灌注后可能通过上调坏死性凋亡主要通路关键因子RIP-1、RIP-3的表达,从而促进坏死性凋亡的发生加重肾脏损害,随着再灌注时间的延长作用越明显。2.肾移植后辅以HBO治疗可能通过抑制移植肾组织中RIP-1和RIP-3的表达,而减少坏死性凋亡的发生,发挥肾脏保护作用。