背景:乳腺癌已成为全球范围内女性最常见的恶性肿瘤之一，也是引起女性死亡的重要病因。而乳腺癌复发、转移是导致乳腺癌患者死亡的最主要原因。转移性乳腺癌治疗相当棘手，预后很差。近年来，关于乳腺癌转移相关基因的筛选研究已成为目前乳腺癌转移研究领域的热点。而Cullin7基因作为我们前期试验研究筛选出来的乳腺癌转移相关候选基因之一，它属于Cullin基因家族成员。本实验研究采用免疫组织化学法研究Cullin7在乳腺正常组织、良性乳腺肿瘤、乳腺癌、乳腺癌腋窝淋巴结转移灶组织中的蛋白表达，分析并研究Cullin7表达情况与乳腺癌转移关系。目的：通过检测cullin7基因在正常乳腺组织、良性乳腺肿瘤、乳腺癌组织、乳腺癌腋窝淋巴结转移灶的蛋白表达，探讨其表达差异与患者临床病理因素、乳腺癌的形成、发展和转移的相关关系。从免疫组化的层面上证实cullin7作为乳腺癌转移相关候选基因的可靠性。方法1.收集广州医科大学附属肿瘤医院乳腺肿瘤外科2011年7月—2013年7月期间的手术切除标本。其中正常乳腺组织13例；乳腺良性肿瘤20例；乳腺浸润性导管癌68例，其中淋巴结转移35例；乳腺癌腋窝淋巴结转移灶32例。TNM分期系统依据国际抗癌联盟和美国癌症联合会2010年制定的第7版乳腺癌PTNM分期。组织标本进行常规病理（HE染色）检查，明确其组织学类型、病理特征（分化程度及淋巴结转移）及临床分期。患者均为女性，年龄37-66岁之间，平均46.4岁，中位年龄47岁。其中乳腺癌患者，绝经前37例，绝经后31例。I期：21例，II期：20例，III期27例。35例已发生淋巴结转移，33例无淋巴结转移。所有患者术前均未进行化疗、放疗及内分泌治疗。2.采用免疫组化SP法检测正常乳腺组织、良性乳腺肿瘤、乳腺浸润性导管癌组织、乳腺癌腋窝淋巴结转移灶中的Cullin7蛋白表达，分析各组织中Cullin7蛋白表达的差别，同时分析Cullin7蛋白在乳腺癌中的表达与患者年龄、月经状况、肿瘤大小、腋窝淋巴结是否转移，临床分期、病理类型、组织学分级之间的关系，及与ER、PR、Her-2的相关性。采用X2检验分析了不同乳腺组织中cullin7的蛋白表达差异；相关性检验采用Spearman相关分析。P<0.05为差异有统计学意义。结果1.13例正常乳腺中，表达以（-）为主。20例良性乳腺肿瘤中，表达以（+）为主。68例乳腺癌中，表达以（+）⁺⁺为主。32例乳腺癌腋窝淋巴结转移灶组中，表达以（++）⁺⁺⁺为主。其中将（-）⁺判定为弱阳性表达（cullin7蛋白低表达），（++）⁺⁺⁺判定为强阳性表达（cullin7蛋白高表达）。正常乳腺组织组、良性乳腺肿瘤组，乳腺浸润性导管癌组及乳腺癌腋窝淋巴结转移灶组中cullin7蛋白强阳性表达率分别是：0,30.0%，55.9%，78.1%。Cullin7蛋白强阳性表达在正常乳腺组和良性乳腺肿瘤组，在正常乳腺组和乳腺癌组，正常乳腺组和乳腺癌腋窝淋巴结转移灶组，良性乳腺肿瘤组和乳腺浸润性导管癌组，良性乳腺肿瘤组和乳腺癌淋巴结转移灶组，乳腺浸润性导管癌组和乳腺癌腋窝淋巴结转移灶组二组间的差别，均有统计学意义（p＜0.05）。即乳腺癌淋巴结转移灶组与其他组比较，差异均有统计学意义（p＜0.05）。2. Cullin7蛋白表达与腋窝淋巴结是否转移、组织学分级之间有统计学上的相关性（p＜0.05），与是否绝经、肿瘤大小、病理类型、临床分期之间无明显相关（p>0.05）。3. Cullin7蛋白在乳腺癌组织中的表达分别与ER显著负相关（P<0.05），但与PR、 C-erbB-2不相关（P>0.05）。提示乳腺癌组织中Cullin7蛋白高表达，其内分泌治疗效果可能不佳。结论1. Cullin7蛋白的强阳性表达率在乳腺癌中显著高于乳腺良性肿瘤和正常乳腺组织，提示Cullin7高表达可能促进乳腺癌的形成、发生。Cullin7基因有可能作为区分良恶性乳腺组织的生物学标志的价值。2. Cullin7在乳腺癌中的表达与组织学分级、腋窝淋巴结是否转移在统计学上存在相关性。与患者是否绝经、肿瘤直径大小、病理类型以及临床分期无显著相关性。3.乳腺癌淋巴结转移灶组中Cullin7蛋白的强阳性表达率明显高于其他三组，并且Cullin7的强阳性表达率在有淋巴结转移的乳腺癌中显著高于无淋巴结转移的乳腺癌组织，提示Cullin7高表达在乳腺癌的侵袭、转移中起促进作用，Cullin7有可能作为乳腺癌转移的相关候选基因。4. Cullin7蛋白在乳腺癌组织中的表达分别与ER显著负相关（P<0.05），但与PR、 C-erbB-2不相关（P>0.05）。乳腺癌组织中Cullin7蛋白高表达提示内分泌治疗效果可能不佳。5.通过外显子测序检测杂合性缺失方法筛选乳腺癌转移的相关候选基因存在一定可靠性。