吉林省公主岭与敦化地区大豆根腐镰孢菌的系统鉴定

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大豆根腐病是世界大豆生产中危害严重的土传性真菌病害,极大程度地导致大豆的产量和品质下降。镰孢属,是造成大豆根腐病的重要致病菌之一,但在世界各地造成大豆根腐镰孢菌种类不尽相同。为明确吉林省敦化和公主岭大豆根腐镰孢菌种类,本研究对发病植株进行病原真菌的分离与鉴定,以期为吉林省的大豆根腐病的防治提供科学依据。从吉林省敦化和公主岭大豆试验田采集了93份具有典型大豆根腐病植株进行病原真菌的分离纯化,并利用ITS、TEF1-α、RPB2这3个保守基因进行核酸序列一致性分析,并结合形态学观察去鉴定疑似镰孢菌分离物的种属地位。基于ITS、TEF1-α、RPB2这3个保守基因对镰孢菌分离物进行单基因系统发育分析和多基因联合系统发育分析进一步明确镰孢菌分离物之间的亲缘关系,并利用离体叶片接种法和下胚轴直接接种法去评价镰孢菌分离物的致病性。其研究结果如下:1.本研究通过对吉林省敦化和公主岭地区的发病植株进行病原真菌的分离,得到了122株真菌,并鉴定出4种镰孢菌共104株,其中腐皮镰孢菌(F.solani)占64.42%,尖镰孢菌(F.oxysporum)占33.65%,轮枝镰孢菌(F.verticillioides)占0.96%,层出镰孢菌(F.proliferaum)占0.96%。在公主岭地区的发病植株分离鉴定出4种镰孢菌共57株,其中腐皮镰孢菌(F.solani)占91.23%,尖镰孢菌(F.oxysporum)占5.27%,轮枝镰孢菌(F.verticillioides)占1.75%,层出镰孢菌(F.proliferaum)占1.75%。在敦化地区的发病植株分离鉴定出2种镰孢菌共47株,其中腐皮镰孢菌(F.sol ani)占31.91%,尖孢镰刀菌(F.oxysporum)占68.09%。吉林省这2个地区大豆根腐病镰孢菌优势病原菌不尽相同,在公主岭地区以腐皮镰孢菌(F.solani)为主,而敦化地区主要以尖镰孢菌(F.oxysporum)为主。2.系统发育分析结果表明,只通过单个基因进行核酸序列分析或单基因系统发育分析均难以使镰孢菌属的分类鉴定结果极其精确,但是通过ITS、TEF-1α、RPB2这3个基因联合系统发育分析可以使镰孢菌属的分类鉴定结果更加快速、准确。3.镰孢菌分离物的致病性分析结果表明,在公主岭地区的57株镰孢菌分离物中以尖镰孢菌(F.oxysporum)的致病性较强,轮枝镰孢菌(F.verticillioides)和层出镰孢菌(F.proliferaum)的致病性次之,腐皮镰孢菌(F.solani)的致病性较弱;在敦化地区的47株镰孢菌分离物中以尖镰孢菌(F.oxysporum)的致病性较强,腐皮镰孢菌(F.solani)的致病性较弱。
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