【摘 要】
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斑玉蕈(Hypsizygus marmoreus)又名真姬菇,因其具有较高的营养价值和药用价值而深受消费者喜爱。在斑玉蕈等食用菌双核菌丝细胞中,存在两种交配型的单核,理论上这两种核型应始终保持1:1的比例。然而,在实际工作中,斑玉蕈双核菌丝采用原生质体制备获得的两种交配型单核体菌株没有保持预期比例,这种现象被称为原生质体偏分离现象。本研究通过分离制备斑玉蕈单核体菌株、分析其交配型位点结构及其多态性
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斑玉蕈(Hypsizygus marmoreus)又名真姬菇,因其具有较高的营养价值和药用价值而深受消费者喜爱。在斑玉蕈等食用菌双核菌丝细胞中,存在两种交配型的单核,理论上这两种核型应始终保持1:1的比例。然而,在实际工作中,斑玉蕈双核菌丝采用原生质体制备获得的两种交配型单核体菌株没有保持预期比例,这种现象被称为原生质体偏分离现象。本研究通过分离制备斑玉蕈单核体菌株、分析其交配型位点结构及其多态性,可为斑玉蕈等食用菌杂交育种理论研究及品种改良等工作奠定基础。本研究首先选用9个斑玉蕈双核菌株为材料,分别经原生质体制备与再生获得单核体菌株,将在原生质体偏分离中出现数量多的单核体菌株定义为强势核单核体菌株,出现数量少的单核体菌株定义为弱势核单核体菌株,结果表明:共分离得到强势单核体菌株和弱势单核体菌株各9株,经验证每一双核体菌株分离出的强势单核体菌株和弱势单核体菌株比例均不符合理论分离定律1:1,原生质体偏分离现象明显。其次,通过强势单核体菌株与强势单核体菌株杂交、强势单核体菌株与弱势单核体菌株杂交、弱势单核体菌株与弱势单核体菌株杂交而获得多组杂交双核菌株,以分析核质对杂交双核菌株菌丝生长的影响,结果表明:单单杂交实验共得到180个单单杂交双核菌株,统计同核异质单单杂交种共70对。其中,两强势单核体菌株杂交形成的双核体菌种共25对,两弱势单核体菌株杂交形成的双核体菌种共20对,由一强势单核体菌株和一弱势单核体菌株杂交形成的双核体菌种共25对。核质对菌丝生长影响实验结果表明:以上三个杂交双核群体菌丝生长速度差异不明显,说明在配对亲和过程中细胞核对单单杂交种菌丝生长速度几乎没有影响。然而,多数同核异质双核菌株菌丝生长速度存在一定差异,推测细胞质可能在一定程度上影响杂交双核菌株菌丝的生长。随机选取53个单单杂交种进行栽培,均可以正常出菇,而单核体菌株的强弱在单单杂交育种中对农艺性状没有明显影响。最后,本研究采用生物信息学方法分析比较基因组重测序后不同斑玉蕈单核体菌株的A和B交配型位点结构及其多态性,结果表明:12个单核体菌株有6种A交配型位点和6种B交配型位点,A交配型位点都包含1~3个不等的HD1和1~2个HD2基因,两翼都具有保守的MIP和B-fg基因。B交配型位点上部分信息素受体基因之间相似性很高,但信息素受体与信息素前体的数量在基因组上的分布差异大。通过分析发现交配型位点的多态性高、变异性大,具有丰富的多态性。
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