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目的:建立海洛因诱导条件性位置性偏爱(Conditioned Place Preference,CPP)模型,分别从行为学、神经化学、分子生物学三个水平探索大鼠内侧前额叶皮层(medial prefrontal cortex,mPFC)边缘前区(prelimbic cortex,PL)在海洛因依赖及成瘾过程中的作用机制。方法:1.建立海洛因诱导CPP模型:20只大鼠分对照组(Control)及海洛因诱导组(Heroin),每组10只。大鼠通过小剂量逐日递增法皮下注射海洛因,建立海洛因诱导CPP模型。首日剂量为0.5mg/kg,以后每日增加0.5mg/kg,连续注射7d。海洛因诱导组大鼠上午皮下注射海洛因后置于CPP白箱内45分钟,间隔6小时后,皮下注射生理盐水置于CPP黑箱内45分钟。对照组大鼠上午和下午都皮下注射等量的生理盐水分别置于白箱和黑箱。利用条件性位置性偏爱系统软件记录大鼠海洛因诱导CPP模型中的各项目行为学参数,判断大鼠海洛因诱导CPP模型建立是否成功,并分析大鼠海洛因诱导CPP模型建立前后大鼠各行为学参数指标的变化。2.PL区损毁:大鼠随机分为假手术组(Sham)和损毁组(Lesion),每组10只。损毁组大鼠利用立体定向化学损毁技术注入鹅膏蕈氨酸(Ibotenic acid,IBO)0.5ul损毁双侧PL区,假手术组大鼠双侧PL区注入0.5ul生理盐水。术后恢复一周后再建立海洛因诱导CPP模型。通过分析比较海洛因注射前后CPP指标,推测双侧PL区损毁后是否影响大鼠海洛因诱导CPP的形成。甲苯胺蓝染色观察PL区损毁位置是否准确。3.PL区NR2亚基的测定:大鼠随机分两组,对照组(Control)和海洛因组。海洛因组16只大鼠,对照组8只大鼠。海洛因组16只大鼠又分为两种状态,即海洛因CPP状态(Heroin addiction)和海洛因戒断状态(Withdraw 7d),每种状态8只。两组大鼠按前述的造模方法建立海洛因诱导CPP模型。对照组和海洛因CPP状态大鼠连续7 d CPP训练后经心脏灌流后取脑,制作厚20um冰冻切片。戒断状态大鼠连续自然戒断7 d,期间每日给予正常饮食,但无海洛因注射。戒断状态大鼠戒断训练结束后经心脏灌流后取脑,制作厚度为20 um冰冻切片。免疫荧光染色检测各组PL区NR2亚基表达。结果:1.经过连续7 d的CPP训练,海洛因诱导组大鼠在白箱运动时间百分比及运动路程百分比都比建模前显著增多(P<0.01)。海洛因诱导组大鼠在黑、白箱穿梭次数明显增加(P<0.05),但平均运动速度无显著变化(P>0.05)。2.经过化学药物损毁双侧PL区后再建立海洛因依赖CPP模型,假手术组在白箱运动时间百分比及在白箱运动路程百分都比建模前明显增多(P<0.01),而手术损毁组大鼠在白箱运动时间百分比、运动路程百分比及在CPP箱中穿梭次数和建模前相比无显著差异(P>0.05)。假手术组在白箱穿梭次数明显高于损毁组(P<0.05)。3.海洛因诱导组戒断状态大鼠在白箱运动时间百分比较建模前及海洛因CPP状态有显著差异(P<0.01)。4.大鼠脑片免疫荧光染色结果显示,CPP状态PL区NR2B表达较对照组明显增强(P<0.01),其他NR2亚基无明显变化。海洛因戒断状态NR2B表达与CPP状态相比较无显著差异(P>0.05),但明显高于对照组(P<0.01)。海洛因戒断状态大鼠PL区NR2A、NR2C表达较CPP状态和对照组皆显著增强(P<0.01)。结论:用CPP系统能成功建立大鼠海洛因诱导CPP模型,大鼠海洛因注射7 d后表现为在白箱运动时间百分比、运动路程百分比及穿梭次数增加,戒断后位置偏爱加剧。PL区化学损毁破坏了海洛因诱导CPP的形成,表明PL区可能参与了海洛因依赖及成瘾相关学习记忆。大鼠海洛因成瘾与PL区NR2亚基的活性密切相关,NR2B可能参与海洛因成瘾的形成,而NR2A、NR2C与海洛因戒断后觅药行为的表达密切相关。