目的:论文主要目的是通过辐射建立炎症损伤模型,在细胞、动物水平研究阿魏酸对NLRP3炎症小体的调节作用,同时考察Sirt1在该调节通路中的作用,探究阿魏酸是否能够通过Sirt1-NLRP3炎症小体通路减轻辐射引起的炎症反应,希望能为辐射防护药物的研究和辐射所致炎症损伤相关分子机制研究提供线索。方法:论文分为三个部分展开:第一部分,在细胞水平上,探究阿魏酸对辐射所致AHH-1细胞炎症反应的影响,建立AHH-1细胞辐射炎症模型,验证阿魏酸的抗炎性和抗辐射性。实验采用cck-8法检测阿魏酸对AHH-1细胞活性的影响,确定合适给药剂量;采用ELISA、Western Blot法检测阿魏酸对辐照后AHH-1细胞中炎性因子的分泌和蛋白表达。第二部分在AHH-1细胞炎症模型基础上,研究阿魏酸对NLRP3炎症小体的调节作用及减轻辐射所致炎症的机制通路。利用Sirt1激活剂和抑制剂,从正反两方面探究阿魏酸对Sirt1的作用及Sirt1在阿魏酸减轻辐射所致NLRP3炎症小体激活通路中的作用,采用Western Blot检测NLRP3炎症小体相关蛋白的表达情况。第三部分建立辐射诱导的小鼠免疫炎症损伤模型,通过体内实验验证阿魏酸通过Sirt1-NLRP3炎症小体减轻辐射所致机体炎症反应。将雌雄各半的120只C57BL/6小鼠随机分为6组:(1)正常对照组;(2)辐射模型组:5Gy全身照射;(3)阳性药组,辐照前40分钟,氨磷汀注射给药;(4)阿魏酸低剂量组:25 mg/kg+5Gy照射;(5)阿魏酸中剂量组:50 mg/kg+5Gy全身照射;(6)阿魏酸高剂量组:100 mg/kg+5Gy全身照射。照射前连续12天每天给小鼠灌胃溶剂或阿魏酸,照射后24h收集血清,采用ELISA试剂盒检测炎性因子IL-1β、IL-18、IL-6和TNF-α的含量;将小鼠免疫器官脾脏和胸腺组织称重并计算脏器指数后,一半固定于10%福尔马林溶液中用于病理检测、免疫荧光检测,另一半冻存于-80℃冰箱用于Western Blot检测。结果:结果表明,在细胞水平上,以4Gy剂量照射可建立AHH-1细胞炎症损伤模型,于照射后12h检测细胞炎性因子的分泌和蛋白的表达为较适宜时间;阿魏酸的给药浓度为0.01、0.1、1μmol/L时对AHH-1细胞具有较好的辐射防护作用;接着根据以上条件,在探究阿魏酸对NLRP3炎症小体的调节作用时发现,辐照后6h,AHH-1细胞中NLRP3炎症小体表达明显,而阿魏酸可抑制辐射所致AHH-1细胞中NLRP3炎症小体的激活;进一步发现阿魏酸能够通过增加Sirt1蛋白的表达减轻辐射所致的AHH-1细胞中NLRP3及炎性因子的表达。在动物水平上,验证阿魏酸对辐射所致小鼠炎症有较好的保护作用,可明显降低小鼠血清中炎性因子IL-1β、IL-18、IL-6、TNF-α的分泌和免疫器官脾脏、胸腺中炎性因子IL-1β、IL-18蛋白的表达,减轻辐射所致小鼠脾脏和胸腺组织中淋巴细胞数量的减少;实验结果进一步证实阿魏酸可以减轻辐射所致的炎症作用并可通过激活Sirt1的表达,减轻NLRP3炎症小体的表达及炎性因子的表达和分泌。结论:在细胞水平和动物水平阿魏酸可以减轻辐射所致的炎症作用,可能作用途径是通过激活Sirt1的表达,减轻NLRP3炎症小体的表达,进而降低炎性因子的表达和分泌。