以二氧化硅粒子为基体的荧光共振能量转移体系在汞离子比率检测中的应用

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本工作根据荧光共振能量转移(FRET)原理,选择硝基苯并二恶唑基荧光染料(NBD)或量子点(QDS)为能量供体荧光团,罗丹明B作为汞离子的识别基团(受体前驱体),在二氧化硅粒子或二氧化硅膜体系中构建能量转移体系;利用罗丹明衍生物与Hg2+络合后的开环反应,利用FRET过程的发生,实现在水环境中对Hg2+的比率检测。本论文的主要内容和结果如下:根据FRET原理,选择NBD作为能量供体,罗丹明衍生物RHB-OET作为离子识别基团。利用溶胶凝胶法在乙醇中制备了核内含有疏水型染料NBD,外层共价键接罗丹明染料衍生物的核壳结构纳米粒子。NBD染料和罗丹明染料衍生物RHB-OET都是通过乙氧基的共水解作用,通过化学键连接在硅粒子上。罗丹明衍生物与汞离子络合后,发生开环反应,在可见光区出现吸收峰,能与供体NBD的荧光发射光谱的能级匹配,在波长为410 nm的激发光作用下,产生从NBD的激发态到罗丹明/汞离子络合物的荧光共振能量转移,实现在水环境中对Hg2+进行比率检测,检测下限为10-7 M。计算了纳米粒子中FRET体系的F?rster临界距离,明确了硅粒子中可发生能量转移的有效区域。考察了体系中供体在汞离子加入前后荧光寿命的变化,从而证明了该过程中荧光共振能量转移的发生。充分利用溶胶凝胶法的优势,在乙醇中制备了具有多层结构的二氧化硅纳米粒子,其内层为不含任何荧光染料的空白层、次内层含有NBD染料、最外层连接有罗丹明染料衍生物SRHB-OET,两种染料均通过乙氧基的共水解作用,经化学键连接在硅粒子的各层上;两种染料层中间隔有一定厚度的二氧化硅层。该结构不仅可让我们调控体系能量转移的效率,还能将能量转移的供体及受体限定在特定的区域,从而实现了较高的能量转移效率(最高转移效率为74%),以及对汞离子的荧光比率检测。本研究还讨论了间隔层的厚度对能量转移效率及离子检测的影响。探讨了该FRET体系对汞离子检测的专一性。结果表明,此探针体系具有较高的灵敏度(检测下限为5*10-7M)、良好的选择性和抗干扰性,并可在pH值59之间进行检测。制备了水溶性CdTe量子点,并利用反相微乳液法制备了多层结构的量子点/二氧化硅复合荧光粒子,粒子粒径在100 nm左右。通过含一种含胺基的硅氧烷(APS)与量子点间的正负电荷作用将量子点固定在硅粒子的内层,而罗丹明染料衍生物SRHB-OET仍是通过水解作用键接在粒子的表层。两者之间可以发生FRET并对汞离子实行比率检测。该检测体系在选择性,抗干扰性及pH适用范围方面具有较好的性能。为了在固体表面构建荧光共振能量转移体系,从而实现比液体检测体系更为便捷的荧光比率检测,我们还结合旋转涂覆法和接枝法,制备了具有多层结构的基于FRET的固体膜检测体系。其内层掺杂有NBD染料,外层接有SRHB-OET染料,实现了供体NBD与受体罗丹明B之间的能量转移。该体系也可以实现对汞离子的比率检测。
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