【摘 要】
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苹果是我国主要栽培果树,苹果产业是我国农业重要产业。苹果病毒病为威胁苹果产业可持续发展的重要病害。近年来,苹果锈果类病毒病害在我国品苹果主产区发生具有逐渐加重的趋势,目前尚缺乏有效的防治苹果类病毒的化学药剂。本研究拟利用新型蛋白诱抗剂及生物菌剂探索防治苹果锈果类病毒病害可能性。通过苹果愈伤组织病程相关蛋白基因表达探究生物制剂可能的抗性机制。主要取得了以下研究结果:1、进行了苹果病毒检测方法及带毒情
【基金项目】
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国家农业产业技术体系项目（CARS27）； 国家重点研发计划“作物免疫调控与物理防控技术及产品研发（SQ2017ZY060102）”；
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苹果是我国主要栽培果树,苹果产业是我国农业重要产业。苹果病毒病为威胁苹果产业可持续发展的重要病害。近年来,苹果锈果类病毒病害在我国品苹果主产区发生具有逐渐加重的趋势,目前尚缺乏有效的防治苹果类病毒的化学药剂。本研究拟利用新型蛋白诱抗剂及生物菌剂探索防治苹果锈果类病毒病害可能性。通过苹果愈伤组织病程相关蛋白基因表达探究生物制剂可能的抗性机制。主要取得了以下研究结果:1、进行了苹果病毒检测方法及带毒情况研究,明确供试果园果实的花脸症状为苹果锈果类病毒（ASSVd）引起的类病毒病害;从田间花叶症状的叶子上检测到苹果坏死花叶病毒（ApNMV）,未检测到苹果花叶病毒（ApMV）;设计苹果褪绿叶斑病毒（ACLSV）、苹果茎痘病毒（ASPV）和苹果茎沟病毒（ASGV）的特异性引物,建立了相同体系扩增的qRT-PCR检测方法。该检测体系的引物特异性强,qRT-PCR扩增反应的溶解曲线单锋;灵敏性是常规RT-PCR的100倍,以构建的质粒为标准品绘制ACLSV、ASGV及ASPV的标准曲线的相关性大于0.980,扩增效率在90%-105%之间,结果表明该方法特异性强、灵敏度高、扩增效率高,在同一体系下实现多种病毒的同时检测。2、采用根灌和叶片喷施蛋白诱抗剂阿泰灵,于果实成熟期调查果树病发病情况,结果显示阿泰灵处理对富士品种防治效果为91.7%,对“G20”富士品系防治效果为92.3%,对秦蜜品种的防治效果为67.3%。表明阿泰灵可以有效防治苹果锈果类病毒病,对不同症状类型的苹果锈果类病毒病害均有防效。3、采用根灌和叶片喷施解淀粉芽孢杆菌菌剂（DP-03）,于果实成熟期调查果实发病情况结果显示,解淀粉芽孢杆菌菌剂对富士品种的防治效果为84.1%,对秦蜜品种为77.0%。表明解淀粉芽孢杆菌可以有效防治苹果锈果类病毒病。4、阿泰灵处理苹果愈伤组织,利用qRT-PCR检测PR1a、PR8、PR10a、PR10b、PR10c、PR10d及DEF1等病程相关蛋白基因的表达情况,结果显示这些基因均被诱导表达,不同基因诱导表达的时间及程度存在差别,其中PR1a最大相对表达量为对照的5.0倍,PR8可以达到41.2倍,PR10a、PR10b、PR10c及PR10d等表达量达到8倍左右,DEF1基因最大相对表达量为3.9倍。这些结果表明阿泰灵可以显著诱导多种病程相关蛋白的表达,可能通过诱导这些基因的表达提高了果树的抗病性。5、解淀粉芽孢杆菌（DP-03）处理苹果愈伤组织,利用qRT-PCR检测PR1a、PR8、PR10a、PR10b、PR10c、PR10d及DEF1等病程相关蛋白基因的表达情况,结果显示解淀粉芽孢杆菌能诱导PR8、PR10a、PR10b、PR10c及PR10d基因上调表达,对PR1a和DEF1基因明显没有诱导作用。解淀粉芽孢杆菌诱导PR8基因上调表达最显著,最大相对表达量为17.6倍,诱导PR10a、PR10b、PR10c及PR10d上调的最大相对表达分别为10.6倍、9.7倍、7.6倍及8.8倍。这些结果表明解淀粉芽孢杆菌可能通过诱导病程相关蛋白提高苹果果树抗病性。
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