肉桂醛是中药材肉桂中的重要活性成分，具有防腐抑菌、保健等作用，广泛应用于食品工业，制药工业等行业。因此，肉桂醛成为当前研究的热点之一，而肉桂醛在水中溶解度低，易氧化等特点，成为肉桂醛应用的弊端。而微乳的发展成为解决溶解性低的主要技术手段之一。前期研究发现，肉桂醛对芽孢杆菌没有抑菌作用，而肉桂醛微乳对芽孢杆菌有很好的抑菌作用，其机理尚不清楚。本课题以枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌为研究对象，一方面对比肉桂醛和肉桂醛微乳分别对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果，以及对比肉桂醛和阳离子抗菌肽分别对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果，初步探究肉桂醛微乳对革兰氏阳性菌的抑菌机理。另一方面，通过Red基因敲除技术成功获得了金黄色葡萄球菌dltD基因缺失的突变体，分析肉桂醛和肉桂醛微乳对突变体的抑菌效果，来揭示肉桂醛微乳对革兰氏阳性菌的抑菌机理。其具体研究如下：1肉桂醛微乳的制备研究肉桂醛微乳制备，选取合适的表面活性剂和助表面活性剂是微乳制作的关键。合适的表面活性剂和助表面活性剂，可以高效提高包被性，而且微乳形成后也有很好的稳定性。吐温-80是肉桂醛形成微乳很好的表面活性剂，表面活性剂和助表面活性剂（乙酸乙酯）质量比Km为2:1时肉桂醛微乳形成的更好。2肉桂醛微乳及阳离子抗菌肽对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果纳米乳将肉桂醛包被起来使得原先带正电荷变成表面不带电荷。EDTA为二价金属阳离子螯合剂，添加EDTA能够螯合枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄杆菌表面的二价金属阳离子，使得枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌细胞表面未被酯化的胞壁酸所带负电荷裸露，则外界进入细胞膜的孔径正电场减弱，表面不带电荷的肉桂醛和带正电荷的枯草菌素就更容易进入。抑菌作用就会增强。3初步探究抑菌机理枯草芽孢杆菌表面二价阳离子的多少决定肉桂醛对其抑菌效果的好坏，由于细胞膜表面胞壁酸的酯化程度决定细胞表面二价阳离子的多少，胞壁酸酯化程度高则细胞表面所带阳离子就少，反之细胞表面所带阳离子就多。而且dlt基因的表达量决定着胞壁酸的酯化程度，dlt基因的表达量多则胞壁酸酯化程度就高。4金黄色葡萄球菌dltD突变体的制备以金黄色葡萄球菌对象，利用Red同源重组技术，成功得到金黄色葡萄球菌dltD突变体。本研究初步探索了Red重组技术制作金黄色葡萄球菌突变体的实验条件，确定了试验过程中L-阿拉伯木聚糖的诱导时间和浓度，L-阿拉伯糖最适诱导浓度为50mmol/L，并且阿拉伯糖诱导时间也摸索了其条件，认为在反应终止前1h添加对其诱导效果相对理想。并且电转化后恢复培养的时间要控制在1h。5验证表面正电荷在整个抑菌中的作用枯草芽孢杆菌168和金黄色葡萄球菌dltD突变体细胞表面胞壁酸酯化程度弱，金黄色葡萄球菌细胞表面胞壁酸酯化程度强。dltD基因可以影响细胞表面的酯化程度，从而改变表面电荷。肉桂醛对革兰氏阳性菌的抑菌效果依赖于细胞表面二价阳离子（镁离子）的影响。dltD基因表达越多，细胞表面酯化程度就越强，表面阳离子就越少，肉桂醛就越不容易进入细胞，抑菌效果就会越弱。