目的: 恶性肿瘤是当前继心脑血管疾病之后危害人类健康的主要疾病之一。据世界卫生组织（WHO）统计，全世界每年发病的约700万人，死于癌症的约500万人，其中我国每年发病的约160万人，死于该病的约130万人。因此肿瘤的治疗已经成为当今世界关注的热点问题之一。目前公认的治疗肿瘤的方法有手术、放射治疗和药物治疗，还有一种实验性方法即免疫治疗或称为生物治疗已成为继三大肿瘤治疗方法后的又一治疗手段。但是这些方法都给机体带来不同程度的损伤。手术治疗是治疗肿瘤首选的方法之一，但是单靠手术治疗并不能防止肿瘤的复发和远处转移，而且往往给患者带来身体上的痛苦；放射治疗目前已能根治多种肿瘤，但它可使患者产生骨髓抑制、消化道反应、脱发等严重不良反应，以上两种方法都只局限于局部肿瘤；生物治疗只适用于经过治疗后残存的肿瘤或某些与免疫相关的肿瘤；化疗是目前治疗肿瘤的最有效的方法，但是它对肿瘤细胞的选择性抑制作用不强，全身用药毒性较大。随着中医药的发展，具有我国传统特色的中西医结合治疗方法也已经成为治疗肿瘤的又一治疗方法。中医的扶正固本可以提高机体的免疫功能，减少手术、放、化疗及免疫治疗的毒副反应，使肿瘤患者有较好的生存质量，从而提高疗效。但单纯中医药治疗根除病灶困难，杀灭癌细胞作用不强、抗肿瘤疗效重复性差<WP=4>及剂型使用不便，因此中医药作为佐剂辅助西医治疗肿瘤成为治疗肿瘤的重要方法。本实验采用本科室研制的补肾健脾方药(tonifying kidney and spleen recipe, TR)，通过环磷酰胺治疗荷S180瘤小鼠，并辅以补肾健脾方药，观察肿瘤重量、白细胞数、脾脏淋巴细胞增殖活性以及肿瘤组织中P53和BCL2基因的表达情况，并观察中药血清对体外培养肿瘤细胞增殖，目的在于观察补肾健脾方药对化疗药减毒增效作用，及从分子水平探讨该方药抗肿瘤作用的机制，旨在为其临床应用提供实验的理论依据。方法：将20±1g昆明小鼠60只，随机分为5组：正常对照组(N组)：正常喂食，不做任何处理；模型组(M组)：0.5ml无菌生理盐水腹腔注射，0.4ml蒸馏水灌胃；补肾健脾方药组(TR组)：0.5ml无菌生理盐水腹腔注射，0.4ml TR方药灌胃；环磷酰胺组(CY组)：2％CY以30mg/kg腹腔注射，0.4ml蒸馏水灌胃；补肾健脾方药加环磷酰胺组(TR＋CY组)：2％CY以30mg/kg腹腔注射，0.4ml TR方药灌胃。将S180肿瘤细胞经小鼠腹腔传代７～８天后取出腹水，经GKN液洗2遍，调整细胞浓度为6.25×10６个／ml，以0.2ml/只接种于后四组小鼠右前肢皮下，于第二天开始按上述方法给药，每天一次，连续10天。每天观察小鼠生长的一般情况。于末次给药后第2天，分别称量各组小鼠的体重，剪尾取血检测WBC数；摘眼球放血处死小鼠，剥离肿瘤组织称量瘤重；同时取每组小鼠脾脏，用MTT法测脾脏淋巴细胞增殖活性，取后四组小鼠肿瘤用DNA梯状条带作肿瘤组织细胞凋亡分析及用RT-PCR检测P53 mRNA的表达。 <WP=5>另取20±1g昆明小鼠40只，随机分为4组：正常对照组(N组)：正常饮食，不做任何处理；补肾健脾方药组(TR组)：0.5ml无菌生理盐水腹腔注射，0.2ml TR方药灌胃；环磷酰胺组(CY组)：2％CY以30mg/kg腹腔注射，0.2ml蒸馏水灌胃；补肾健脾方药加环磷酰胺组(TR＋CY组)：2％CY以30mg/kg腹腔注射，0.2ml TR方药灌胃。3天后，于灌胃后2小时摘眼球后取血，收集血清备用。取小鼠腹腔传代的肿瘤细胞，培养6～8代后，调整细胞浓度为5.0×106个／ml，加于96孔板中，在培养基中加入含药血清使其终浓度为10%，用MTT法检测肿瘤细胞的增殖活性。结果1. 动物的一般表现经过治疗后TR组较CY组小鼠饮食良好，毛发光泽，对外界刺激反应灵敏。2. 肿瘤重量比较接种S180肿瘤细胞株10天后，处死小鼠剥离肿瘤，称量肿瘤重量。与M组（1.329±0.576g）相比较，TR组（1.317±0.658g）没有统计学差异(P＞0.05)。CY组（0.622±0.231g）和TR+CY组(0.565±0.298g)的肿瘤重量明显低于M组(P<0.01)。TR+CY组瘤重均值较CY组偏低，但两组之间无显著性差异(P＞0.05)。3. 白细胞比较 正常对照组小鼠白细胞为7.983±0.343×109/L，M组为8.628±0.886×109/L，与NS组比较无明显差别(P>0.05)；CY组小鼠白细胞数为4.057±0.886×109/L，明显低于M组小鼠(P<0.01)。TR组小鼠白细胞数为6.765±0.674×109/L，与M<WP=6>组相比无明显统计学差异(P＞0.05)。TR+CY组小鼠白细胞数5.571±0.967×109/L，明显高于CY组小鼠(P<0.05)。4. 脾脏淋巴细胞增殖试验用MTT法测定脾脏淋巴细胞增殖活性。M组小鼠淋巴细胞增殖活性为1.0997±0.0418，N组小鼠脾淋巴细胞增殖活性为1.1195±0.0685，M组与N组相比较无明显统计学差异(P>0.05)。TR组小鼠脾脏淋巴细胞增殖活性为1.569±0.0962，明显高于M组(P<0.05)。CY组为1.156±0.156,与M组小鼠脾脏淋巴细胞增殖活性之间无明显统计学差异(P＞0.05)。TR+CY组小鼠脾淋巴细胞增殖活性为1.8066±0.486，明显高于M组(P<0.05)，TR组与TR+CY组和CY组相比较均有明显的统计学差异(P<0.05)，但两组间无明显统计学差异(P>.05)。5. 肿瘤组织DNA梯状条带分析肿瘤组织DNA经琼脂糖凝胶电泳结果显示，模型组肿瘤基因组