鱼藤素是植物中最常见的鱼藤酮类化合物之一,近年发现其具有强抗癌活性,在预防及治疗肺癌两方面均具有潜在的应用前景。本研究应用生物技术方法对鱼藤的嫩茎、叶进行组织培养,并从愈伤组织中提取和分离出鱼藤素,同时对鱼藤素的还原反应进行初步探讨。实验结果如下:1.鱼藤的组织培养条件优化比较0.1%氯化汞和2%次氯酸钠不同灭菌时间对组培的影响,并探讨不同pH值和激素浓度组合对鱼藤茎、叶组织培养的影响。结果表明:鱼藤茎、叶组织培养适宜条件为:采用2%次氯酸钠灭菌外植体14min,培养基的pH值为6.0,激素浓度为2,4-D 2.0mg/mL、6-BA 1.0mg/mL。此时组织培养的死亡率和污染率均不高于16%;愈伤组织的诱导率最高95%;茎、叶愈伤组织收获量也最多,分别为3.9522g、3.5944g。2.鱼藤素的提取条件优化采用超声波辅助浸提、振荡提取、索氏提取三种方法从愈伤组织中提取鱼藤素,并与鱼藤各个部位进行比较。结果表明:在相同条件下,提取鱼藤素的适宜方法为超声波辅助浸提5min,鱼藤素提取率为10.31%。组培到60d时,愈伤组织中鱼藤素含量最高为51.40%;提取率比较结果为根>根瘤>愈伤组织>叶>茎,根的提取率最高为9.29%,愈伤组织的提取率为8.23%。3.鱼藤素的分离条件优化采用硅胶柱层析(流动相为石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱)和薄层层析分离,应用HPLC(反相C18柱、流动相甲醇-水(66:34)、流速0.5ml/min、柱温30℃)检测。结果显示:当硅胶柱层析以流动相为石油醚:乙酸乙酯=5:1时,鱼藤素分离效果好,含量为96.76%;薄层层析以展开剂为丙酮:氯仿:石油醚=1:2:7,当Rf2=0.31时,能够较好的分离出鱼藤素,鱼藤素含量为93.33%。4.还原衍生条件的探讨试样溶解于甲醇中,与硼氢化钠发生还原反应,通过高效液相色谱法检测分析。实验表明:在氢氧化钠条件下,加热到80℃,试样与硼氢化钠反应3h,鱼藤素反应完全。