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目的 探讨温阳祛瘀法治疗系统性硬皮病(SSc)的药理机制。 方法 ①含药血清的制备:临床收集SSc病例12例,根据治疗不同分成对照组(3例)、西药组(3例)、中药组(2例)、中西药组(4例)。对照组在治疗前抽取血清,各处理组在治疗2个月后抽取血清。②采用组织块法进行正常皮肤和SSc皮肤成纤维细胞的体外培养。③MTT比色法检测温阳祛瘀法的含药血清对正常和SSc皮肤成纤维细胞生长增殖的影响。④用流式细胞仪技术检测温阳祛瘀法的含药血清对正常和SSc皮肤成纤维细胞生长周期的影响。⑤HP(羟脯氨酸)比色法测正常和SSc皮肤成纤维细胞的胶原合成。 结果 ①温阳祛瘀含药血清改变正常和SSc皮肤成纤维细胞的细胞形态。②不同浓度的含药血清对正常皮肤成纤维细胞的增殖均具有显著抑制作用,与对照组相比差异具有显著性(P<0.05,P<0.01),且中西药组比西药组抑制作用更强(P<0.01)。同时,与对照组相比,不同浓度的西药组、中西药组血清均能显著抑制SSc皮损成纤维细胞的增殖,具有统计学意义(P<0.05,P<0.01),而中药组血清浓度为20%时才显著抑制其增殖(P<0.01);与西药组相比,20%中西药组血清抑制作用更强(P<0.01)。③20%中药组血清能显著提高SSc皮肤成纤维细胞的G~G;期细胞比例(尸<0.01),显著降低S期细胞和仇一书期细胞比例(尸<0.01)。同时20%中药组血清亦能显著提高正常皮肤成纤维细胞的G(一G,期细胞比例(尸<0.01),显著减少S期细胞和吼一-M期细胞比例(尸<0.01)。④SSc皮损成纤维细胞的胶原合成量比正常皮肤成纤维细胞显著增加(尸<0.01)。 结论①温阳祛疲法对SSc皮肤成纤维细胞的生长有明显抑制作用,且中西药结合对其抑制作用优于单纯西药或中药,说明中药与西药可能具有协同作用。②温阳祛癖法通过抑制SSc皮损成纤维细胞的增殖,进而总体上降低ECM的过度合成,可能是治疗SSc的作用机理之一。③干扰细胞的生长周期,可能是温阳祛癖法抑制SSc皮肤成纤维细胞增殖的机理之一。④温阳祛癖法对体外培养的正常皮肤和SSc皮损成纤维细胞的干扰作用不具有选择性。⑤在体外SSc皮损成纤维细胞的胶原合成高于正常皮肤成纤维细胞,是SSc的发病机制之一。