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目的：
本研究通过对急性早幼粒细胞白血病（APL）患者治疗前后的骨髓配对标本进行miRNA芯片检测，筛选出差异表达的miR-638；基于TaqMan探针的实时荧光RT-PCR方法检测miR-638表达水平，分析miR-638在体外诱导的APL细胞系中的表达规律；对不同白血病标本进行miR-638表达水平检测，分析评价miR-638表达水平在APL的辅助诊断、治疗及复发监测中的临床应用价值。方法：
1.APL患者治疗前后差异miRNAs的筛选与实时荧光RT-PCR验证
收集APL患者治疗前后的骨髓配对标本，进行miRNA芯片检测，对基因芯片表达谱分析得出的差异表达miR-638并用实时荧光RT-PCR法进行验证。
2.检测miR-638在不同髓系白血病细胞系中的表达
细胞水平验证体外诱导APL细胞系中miR-638的表达规律，用NB4和HL-60细胞作为诱导分化模型，加入ATRA药物后分析miR-638表达水平。采用流式细胞术检测ATRA诱导下NB4细胞的髓样特异性表面标志物CD11b表达。3.评价miR-638表达水平在APL诊疗中的应用价值
（1）评价骨髓miR-638表达水平在APL辅助诊断中的价值
分别对30例初诊APL患者、初诊AML患者及正常对照骨髓标本进行实时荧光RT-PCR检测，采用ROC曲线分析miR-638的诊断性能。
（2）评价骨髓miR-638表达水平在APL患者治疗反应和复发监测中的价值
分别对30例APL患者初诊与诱导治疗后的骨髓标本进行miR-638表达水平检测；同时对4例APL复发患者的骨髓标本进行miR-638表达水平检测。
（3）评价miR-638表达水平在APL患者微小残留病（MRD）及治疗监测中的价值
对30例APL患者诱导治疗前后配对骨髓标本进行MRD检测，并进行相关性分析。同时收集诱导治疗前后APL患者外周血样本进行miR-638表达水平检测，与骨髓miR-638进行相关性分析。
结果：
1.APL患者治疗前后骨髓基因芯片分析与实时荧光RT-PCR验证结果
通过火山图对芯片数据进行过滤，确定了APL患者骨髓标本中差异表达的miRNAs。经过筛选，发现有5个miRNAs下调，25个上调。在25个上调的miRNAs中，miR-638显著上调。对包括miR-638在内的候选miRNAs进行实时荧光RT-PCR验证，结果完全符合。
2.体外诱导APL细胞系中miR-638的表达规律
与非APL细胞系（U937、THP-1、K562、Kasumi-6、HEL）相比，miR-638在HL-60、NB4等APL细胞系中显著下调，差异有统计学意义（P＜0.01）；随着作用时间延长，ATRA处理后HL-60细胞和NB4细胞miR-638表达上调（P＜0.05），这与CD11b表达上调相一致。
3.miR-638表达水平在APL诊疗中的应用价值
（1）骨髓miR-638表达水平在APL辅助诊断中的价值
与正常对照组相比，APL患者骨髓miR-638显著下调（P＜0.01），miR-638在AML患者中表达降低，有统计学差异（P＜0.01）；ROC曲线分析表明，当cut off值为3.025时，ROC曲线下面积（AUC）为0.9602。
（2）骨髓miR-638表达水平在APL治疗反应和复发中的价值
骨髓miR-638表达水平在初诊APL患者中表达较低，在诱导治疗和完全缓解后（CR）表达明显升高，差异具有统计学意义（P＜0.01），诱导治疗后组与CR组miR-638表达水平无显著性差异（P＞0.05）。APL复发患者miR-638表达下调，但仍高于APL初诊患者miR-638表达水平，差异具有统计学意义（P＜0.01）。
（3）miR-638表达水平在APL患者MRD及治疗监测中的价值
在APL初诊患者中，骨髓miR-638表达水平与PML-RARα表达呈负相关（r=0.800，P＜0.01）。在APL诱导分化后，骨髓miR-638表达水平也与PML-RARα表达呈负相关（r=0.500，P＜0.01）。骨髓miR-638的表达也与MRD监测结果呈负相关。外周血与骨髓miR-638表达水平呈正相关（r=0.982，P＜0.01）。
结论：
1.骨髓miRNA表达谱分析筛选出差异表达的miR-638，经实时荧光RT-PCR方法验证，结果完全符合。
2.miR-638在NB4细胞中存在低表达，诱导分化后表达上升。
3.骨髓miR-638在初诊、完全缓解和复发APL患者中的存在差异表达，骨髓miR-638表达水平上调反映了APL患者的治疗反应，骨髓miR-638表达水平可能作为APL辅助诊断的指标。
4.骨髓miR-638表达水平与PML-RARα、MRD监测结果均呈负相关，骨髓miR-638可能作为MRD监测指标；外周血与骨髓miR-638表达水平呈显著正相关，外周血miR-638表达水平可能作为治疗监测指标。
本研究通过对急性早幼粒细胞白血病（APL）患者治疗前后的骨髓配对标本进行miRNA芯片检测，筛选出差异表达的miR-638；基于TaqMan探针的实时荧光RT-PCR方法检测miR-638表达水平，分析miR-638在体外诱导的APL细胞系中的表达规律；对不同白血病标本进行miR-638表达水平检测，分析评价miR-638表达水平在APL的辅助诊断、治疗及复发监测中的临床应用价值。方法：
1.APL患者治疗前后差异miRNAs的筛选与实时荧光RT-PCR验证
收集APL患者治疗前后的骨髓配对标本，进行miRNA芯片检测，对基因芯片表达谱分析得出的差异表达miR-638并用实时荧光RT-PCR法进行验证。
2.检测miR-638在不同髓系白血病细胞系中的表达
细胞水平验证体外诱导APL细胞系中miR-638的表达规律，用NB4和HL-60细胞作为诱导分化模型，加入ATRA药物后分析miR-638表达水平。采用流式细胞术检测ATRA诱导下NB4细胞的髓样特异性表面标志物CD11b表达。3.评价miR-638表达水平在APL诊疗中的应用价值
（1）评价骨髓miR-638表达水平在APL辅助诊断中的价值
分别对30例初诊APL患者、初诊AML患者及正常对照骨髓标本进行实时荧光RT-PCR检测，采用ROC曲线分析miR-638的诊断性能。
（2）评价骨髓miR-638表达水平在APL患者治疗反应和复发监测中的价值
分别对30例APL患者初诊与诱导治疗后的骨髓标本进行miR-638表达水平检测；同时对4例APL复发患者的骨髓标本进行miR-638表达水平检测。
（3）评价miR-638表达水平在APL患者微小残留病（MRD）及治疗监测中的价值
对30例APL患者诱导治疗前后配对骨髓标本进行MRD检测，并进行相关性分析。同时收集诱导治疗前后APL患者外周血样本进行miR-638表达水平检测，与骨髓miR-638进行相关性分析。
结果：
1.APL患者治疗前后骨髓基因芯片分析与实时荧光RT-PCR验证结果
通过火山图对芯片数据进行过滤，确定了APL患者骨髓标本中差异表达的miRNAs。经过筛选，发现有5个miRNAs下调，25个上调。在25个上调的miRNAs中，miR-638显著上调。对包括miR-638在内的候选miRNAs进行实时荧光RT-PCR验证，结果完全符合。
2.体外诱导APL细胞系中miR-638的表达规律
与非APL细胞系（U937、THP-1、K562、Kasumi-6、HEL）相比，miR-638在HL-60、NB4等APL细胞系中显著下调，差异有统计学意义（P＜0.01）；随着作用时间延长，ATRA处理后HL-60细胞和NB4细胞miR-638表达上调（P＜0.05），这与CD11b表达上调相一致。
3.miR-638表达水平在APL诊疗中的应用价值
（1）骨髓miR-638表达水平在APL辅助诊断中的价值
与正常对照组相比，APL患者骨髓miR-638显著下调（P＜0.01），miR-638在AML患者中表达降低，有统计学差异（P＜0.01）；ROC曲线分析表明，当cut off值为3.025时，ROC曲线下面积（AUC）为0.9602。
（2）骨髓miR-638表达水平在APL治疗反应和复发中的价值
骨髓miR-638表达水平在初诊APL患者中表达较低，在诱导治疗和完全缓解后（CR）表达明显升高，差异具有统计学意义（P＜0.01），诱导治疗后组与CR组miR-638表达水平无显著性差异（P＞0.05）。APL复发患者miR-638表达下调，但仍高于APL初诊患者miR-638表达水平，差异具有统计学意义（P＜0.01）。
（3）miR-638表达水平在APL患者MRD及治疗监测中的价值
在APL初诊患者中，骨髓miR-638表达水平与PML-RARα表达呈负相关（r=0.800，P＜0.01）。在APL诱导分化后，骨髓miR-638表达水平也与PML-RARα表达呈负相关（r=0.500，P＜0.01）。骨髓miR-638的表达也与MRD监测结果呈负相关。外周血与骨髓miR-638表达水平呈正相关（r=0.982，P＜0.01）。
结论：
1.骨髓miRNA表达谱分析筛选出差异表达的miR-638，经实时荧光RT-PCR方法验证，结果完全符合。
2.miR-638在NB4细胞中存在低表达，诱导分化后表达上升。
3.骨髓miR-638在初诊、完全缓解和复发APL患者中的存在差异表达，骨髓miR-638表达水平上调反映了APL患者的治疗反应，骨髓miR-638表达水平可能作为APL辅助诊断的指标。
4.骨髓miR-638表达水平与PML-RARα、MRD监测结果均呈负相关，骨髓miR-638可能作为MRD监测指标；外周血与骨髓miR-638表达水平呈显著正相关，外周血miR-638表达水平可能作为治疗监测指标。