目的:研究M2型丙酮酸激酶(PKM2)和调控其泛素化水平的去泛素化蛋白酶(USP20)在胃癌中的表达,对胃癌细胞增殖与侵袭功能的影响,并初步探索其分子机制。方法:1)免疫组织化学法检测PKM2和USP20在胃癌和癌旁组织的表达,分析其与患者预后和临床病理因素的相关性;2)蛋白免疫印迹法和定量PCR方法检测PKM2和USP20在胃癌细胞系和正常胃粘膜上皮细胞中的表达水平,CCK8法、流式细胞检测技术、划痕实验和Transwell法分别检测PKM2和USP20对胃癌细胞增殖、细胞周期、凋亡和迁移的作用;3)蛋白免疫印迹法检测PKM2表达水平改变对E-cadherin、N-cadherin和Vimentin表达的影响,PKM2调控的下游PI3K-Akt-m TOR信号通路蛋白及自噬相关蛋白LC3和ATG5表达变化;4)构建裸鼠移植瘤和肺转移模型,绘制移植瘤生长曲线。检测裸鼠移植瘤组织中PKM2、Vimentin、LC3、E-cadherin、CD34和Ki67的表达。5)蛋白免疫印迹法检测USP20对下游Claspin的调控作用以及LC3和ATG5表达变化。结果:1)PKM2在人胃癌组织中表达水平高于癌旁组织,PKM2高表达患者预后差于低表达组;2)敲低PKM2抑制胃癌细胞增殖和迁移,造成G1-S期阻滞,上皮标志E-cadherin表达升高,间质标志N-cadherin和Vimentin表达降低;3)PKM2敲低抑制移植瘤生长和肺转移瘤形成;4)PKM2敲低可增强自噬效应,表现为LC3I/II转变增多和ATG5表达升高,自噬抑制剂3-MA可逆转PKM2经PI3K-Akt-m TOR信号通路介导的细胞自噬和EMT;5)USP20在人胃癌组织表达水平低于癌旁组织,USP20高表达者预后好于低表达者;6)敲低USP20促进胃癌细胞增殖,加速G1-S期转变,USP20通过对Claspin进行翻译后修饰来调控胃癌细胞增殖;7)USP20过表达可增强自噬效应,表现为LC3I/II转变增多和ATG5表达升高。结论:1)PKM2通过调控PI3K-Akt-m TOR信号通路起促癌作用;2)USP20通过调控Claspin起到抑癌作用;3)PKM2及USP20具有评判术后胃癌病人预后的潜在价值。