实时荧光定量聚合酶链反应对人急性早幼粒细胞白血病的MRD监测

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:judehui01
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目的:白血病是我国十个高发的恶性肿瘤之一,其中以急性髓系白血病最为多见。患者经治疗后,达到临床和血液学的完全缓解,体内仍有106-108个残留白血病细胞,称为微小残留病(minimal residual disease, MRD)。目前认为MRD是导致白血病复发的根源,是导致白血病患者不能长期生存的重要因素,如何提高MRD的检测技术已成为白血病治疗的一个重要课题。近年来,随着维甲酸和三氧化二砷的临床应用,急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia , APL)患者的完全缓解(complete remission, CR)率得到明显的提高,但是仍有部分患者出现复发的现象。一些前瞻性研究表明,监测MRD有助于预后的判断,完善白血病的临床分型和指导个体化治疗。实时荧光定量PCR技术可以使PCR产物积累在PCR扩增过程中进行实时监控,因而它具有特异性强,准确度和自动化程度高等特点。APL最为常见的染色体易位为t(15;17)(q22;q21),造成早幼粒细胞白血病基因(promyelocytic leukemia,PML)与维甲酸受体α基因(Retinoic acid receptorα,RARα)的重排,形成PML- RARα融合基因。本研究利用PML- RARα融合基因作为肿瘤标志,应用实时荧光定量PCR技术,检测了25例不同状态的APL患者(诊断、CR和复发),并对其中6例患者的MRD进行了动态追踪,进而对此法的临床意义进行了研究。方法:1.应用体外转录的方法构建目的基因PML-RARα及管家基因ABL的RNA标准品。提取人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4的
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