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目的:长时间暴露于强光下可引起视网膜光损伤,尤其是其中蓝光部分。这种光化学损伤可累及光感受器细胞和视网膜的色素上皮细胞(RPE细胞)。以往的研究多着重于对光感受器细胞的研究,而视网膜色素上皮细胞对维持正常光感受器细胞的形态、功能具有重要作用。本文即从此入手,研究不同波长光照射对视网膜色素上皮细胞形态、功能影响,试从细胞生物学水平探讨视网膜光损伤的发病机制。方法:酶消化法分离培养人RPE细胞,通过生长曲线的绘制、形态学和免疫学鉴定、透射电镜检查等方法分析RPE细胞的生物学特性;将人RPE细胞置于不同波长光线下培养,通过MTT法、透射电镜检查等研究不同波长光对人RPE细胞体外生长特性的影响。结果:第一部分1、人RPE细胞的培养和生长曲线:体外培养的人RPE细胞接种2小时后细胞开始贴壁生长,3天后细胞伸展,10天融合,传代细胞在3天左右融合。RPE细胞的生长曲线近“S”形,在传代后第一天细胞数略减少,经过2-3天的潜伏期后进入对数生长期,7天后达到生长稳定的平台期。2、体外培养人的RPE细胞透射电镜:超微结构仍保持正常,细胞核呈椭圆形,核染色质均匀,较密集,胞浆细胞器丰富,有丰富的游离核糖体,线粒体、高尔基复合体、粗面内质网,色素含量很少,纵切面尚可见细胞顶端微绒毛、基底膜内褶及细胞间连接复合体(可能为紧密连接、桥粒、中间连接)等结构。3、免疫学鉴定:免疫组织化学染色观察传代培养3-5代的人RPE细胞胞浆内表达细胞角蛋白(AE1/AE3)。第二部分:1、不同波长光对RPE细胞活性的影响:各种光照均使RPE细胞生长变慢,其中,蓝光下培养的细胞生长最慢(P＜0.05),依次为红光、白光,但二者之间差异不明显(P＞0.05),对照组增生最明显(P＜0.05)(F=12.579,P＜0.05)。2、电镜结果显示:红光、白光组人RPE细胞与对照组相比超微结构无明显变化,胞浆内各种细胞器数目较多,结构正常,细胞核圆形,核染色质均匀。但蓝光组与其它各组比较有较大差异,其核染色质稀疏变淡,轻度水肿,胞浆内线粒体、粗面内质网、核糖体等细胞器均减少,进行性变小体增多,细胞界膜不清,有的界膜消失。结论:不同波长光对体外培养的人视网膜色素上皮细胞形态、功能均造成影响,其中蓝光的影响强于红光和白光。