苎麻WRKY基因序列分析及表达模式研究

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苎麻是我国重要韧皮纤维作物之一,随着苎麻不断向坡耕地转移,其抗旱研究尤其是抗旱分子机理研究越来越受到关注。转录因子作为植物防御反应过程中的重要调控因子,其在抗逆研究中的应用越来越广泛。而WRKY蛋白是植物特有的转录因子家族之一,广泛参与响应逆境胁迫、调控植物生长发育。目前,针对WRKY基因家族的系统研究主要集中在模式植物如拟南芥、水稻、烟草中,但在其他作物中的探索则相对较少。本研究以苎麻栽培种“华苎5号”为材料,在前期建立的3个转录组数据库基础上,克隆苎麻WRKY基因,研究其表达模式,为解析其基因功能奠定基础。主要结果如下:(1)从三个苎麻转录组数据库中筛选出26条具备完整CDS的苎麻WRKY基因,分别将其命名为BnWRKY1-BnWRKY26,并成功克隆得到相应的DNA全长。通过构建进化树、分析内含子-外显子基因结构,进一步分析WRKY家族基因的相关特性。分析结果表明,在这26个基因中不存在WRKYGQK核心序列变异,并可依据结合域特点将WRKY基因分为第I类、第II类及第III类。(2)对上述26个苎麻WRKY基因进行表达规律的初步研究,结果表明:将不同生育时期及非生物胁迫下的组织样品进行qRT-PCR分析后,发现所有基因在不同时期茎、叶中均有表达。且对叶片而言,基因在成熟期叶片中具备较高表达水平。此外,26个基因均能响应NaCl或PEG处理。如植株经NaCl胁迫后,BnWRKY17基因在根中的表达量极显著增加。同时,因其同源基因AtWRKY40在植株抵抗高盐、乙烯、真菌等逆境因子时发挥重要作用,故推测BnWRKY17基因在植株防御反应中可能与AtWRKY40具备某些类似功能。以上研究结果不仅可以丰富苎麻WRKY家族基因的基础研究,而且能为苎麻分子育种研究提供宝贵的基因资源。
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