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目的:探讨高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型大鼠肠道菌群的变化,并进一步探讨肠道菌群与IL-22、LPS的相关性。方法:1.购买雄性SD大鼠20只,适应性饲养1周后,随机分为2组,分别给予正常饮食和高脂饮食喂养4周,观察大鼠体重变化,4周后处死大鼠,观察大鼠肝脏病理改变确定是否建模成功;2.采用ELISA法检测大鼠血清白细胞介素-22(IL-22)和脂多糖(LPS)水平,用全自动生化仪检测大鼠血清ALT、AST、GGT、TC、TG水平;3.采用Illumina高通量测序法对肠黏膜细菌16Sr RNA的V3-V4区进行基因测序及生物信息学分析:取大鼠肠粘膜1块,提取其总DNA,对目标区域采用PCR法对16Sr DNA V3-V4区进行扩增和纯化并构建文库,采用Illumina高通量测序平台进行测序,对测序结果进行生物信息学分析,如多样性分析、菌群差异性分析及功能分析等;4.分析肠道菌群与NAFLD代谢指标的相关性:找出正常饮食组和高脂饮食组中肠道菌群门水平上有差异的物种,分别与ALT、AST、GGT、TC、TG、IL-22及LPS进行Spearman相关性分析;5.使用SPSS22.0统计分析软件进行数据分析;符合正态分布的计量资料采用均数±标准差(?x±S)表示;组间比较采用t检验;相关性分析采用Spearman相关性分析。P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.本研究最终正常饮食组纳入4例大鼠,高脂饮食组9例大鼠,4周后正常饮食组大鼠体重明显低于高脂饮食组,差异有统计学意义(P<0.05);2.肝脏病理变化:高脂饮食组大鼠肝脏出现明显的肝细胞脂肪变性和肝小叶的炎症浸润;3.血清代谢指标变化:高脂饮食组大鼠血清ALT、AST、GGT、TC、TG水平均高于正常饮食组大鼠,差异有统计学意义(P<0.05);高脂饮食组大鼠血清LPS水平高于正常饮食组,差异有统计学意义(P<0.05);高脂饮食组大鼠血清IL-22水平低于正常饮食组,差异有统计学意义(P<0.05);4.肠道菌群分析:与对照组相比,高脂饮食组大鼠肠道菌群的多样性增加;在门水平上,高脂组大鼠肠道菌群变形菌门、拟杆菌门及疣微菌门丰富高于正常饮食组(P<0.05),厚壁菌门丰度低于正常饮食组(P<0.05);5.相关性分析:在门水平上,变形菌门(Proteobacteria)与血清ALT、AST、GGT成正相关(P<0.05),与血清IL-22成负相关(P<0.05),与血清LPS成正相关(P<0.05);拟杆菌门(Bacteroidetes)与血清ALT、TC、TG成正相关(P<0.05),与血清LPS成正相关(P<0.05);疣微菌门(Verrucomicrobia)与血清AST、GGT、TC、TG成正相关(P<0.05),与血清IL-22成负相关(P<0.05),与血清LPS成正相关(P<0.05);厚壁菌门(Firmicutes)与血清LPS成负相关(P<0.05)。结论:1.高脂饮食诱导的NAFLD模型大鼠与正常对照组相比,肠道菌群发生了变化,提示肠道菌群紊乱可能为NAFLD的一种发病机制;2.肠道菌群中门水平上,变形菌门与血清IL-22成负相关,与血清LPS成正相关;拟杆菌门与血清LPS成正相关;疣微菌门与血清IL-22成负相关,与血清LPS成正相关;厚壁菌门与血清LPS成负相关;3.IL-22可能为NAFLD大鼠的一种保护性因子,LPS可能为NAFLD大鼠的一种致病性因素。