【摘 要】
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无浆体病(Anaplasmosis)是由几种无浆体(Anaplasma)经蜱媒传播的一种立克次氏体病。无浆体属于立克次体目(Rickettsiales)、无浆体科(Anaplasmataceae)、无浆体属(Anaplasma)。主要种类有嗜吞噬细胞无浆体(A.phagocytophilum)、牛无浆体(A.bovis)、绵羊无浆体(A.ovis)、山羊无浆体(A.capra)和边缘无浆体(A.m
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无浆体病(Anaplasmosis)是由几种无浆体(Anaplasma)经蜱媒传播的一种立克次氏体病。无浆体属于立克次体目(Rickettsiales)、无浆体科(Anaplasmataceae)、无浆体属(Anaplasma)。主要种类有嗜吞噬细胞无浆体(A.phagocytophilum)、牛无浆体(A.bovis)、绵羊无浆体(A.ovis)、山羊无浆体(A.capra)和边缘无浆体(A.marginale)。牛羊感染后会表现消瘦、贫血和黄疸等临床症状,导致增重缓慢,严重时将导致死亡,从而造成严重的经济损失。海南位于热带和亚热带地区,蜱种类繁多、活动范围广,牛羊存在较大的感染无浆体病的风险,牛羊无浆体流行情况及分子特性在海南目前未见相关文献的报道。本次研究使用巢式PCR和常规PCR方法检对海南地区18个市县的黑山羊(N=731)及4个市县的黄牛(N=176)进行无浆体流行病学调查。结果显示,黑山羊和黄牛无浆体感染率为30.1%和14.8%。在黑山羊中检测出四种无浆体,A.bovi、A.pagocytophilum、A.ovis和A.capra,其感染率分别为22.7%、13.8%、2%和3.4%。而在黄牛中检测出三种无浆体,A.bovis、A.pagocytophilum和A.marginale,其感染率分别为11.4%、6.3%和5.7%。本研究发现海南地区不同市县的黑山羊和黄牛中感染的无浆体优势种不同,A.bovis在海南地区的黑山羊和牛感染率最高,以及A.pagocytophilum+A.bovis共同感染情况比较普遍。不同年龄、性别、饲养模式的黑山羊和牛的无浆体感染情况存在差异,散养模式下的黑山羊和牛无浆体感染率(39.7%,73.7%)明显高于圈养模式黑山羊和牛(19.1%,9.3%)。为了对该病原进行溯源分析,基于16S r RNA基因/Gro EL基因/MSP4基因设计引物对无浆体进行PCR扩增,进行同源性和系统发育树的分析。从246株测序结果中,选取具有代表性的42株的无浆体序列,并对选出的42株无浆体序列进行同源性分析及系统发育树分析。系统发育树分析结果显示,基于16Sr RNA基因的9株A.pagocytophilum序列与已知参照序列出现两个独立分支,黑山羊和牛分别聚集在不同的分支上。基于16S r RNA基因的13株A.bovis序列的同源性较高,都聚集在同一分支上。基于MSP4基因10株A.ovis和10株A.marginale的系统发育树中都聚集在同一分支上。基于Gro EL基因的9株A.capra序列的同源性较高都聚集在同一分支上,分支节点支持率高达100%。系统发育树分析显示A.ovis、A.bovis、A.marginale和A.pagocytophilum均无地理隔离分化特征,但A.pagocytophilum存在宿主特异性。本次研究通过对该病原的16S r RNA/Gro EL/MSP4基因进行研究,可以帮助对该病原的传播进行溯源分析,还可以在海南地区的无浆体病原是否存在宿主分化特征及地理分化特征,从而为该病的防治提供有利的支持。
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