体外法评估非淀粉多糖酶的活性及其应用

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本试验通过比较不同温度和p H下不同厂家的木聚糖酶、β-葡聚糖酶的相对酶活,以获得体外消化适宜参数;同时,通过分析不同产地小麦样品的常规营养成分、非淀粉多糖(NSP)含量与能量利用率的关系,以选择NSP含量最高及能量利用率最低的小麦样品;根据适宜参数采用体外法探究不同厂家NSP酶种类及其剂量对小麦净还原糖释放量的影响,以获得小麦的NSP酶酶谱,进而评价NSP酶对小麦及小麦日粮仿生消化能值(SDGE)、仿生干物质利用率(SDDM)和仿生能量利用率的影响,旨在优化NSP酶体外评价参数和酶谱,为快速、准确地体外评价NSP酶在麦类饲料原料的高效利用提供参考。试验分三个部分:第一部分为体外评价非淀粉多糖酶胃肠期温度及p H消化参数的确定。第二部分采集8个不同产地的小麦样品,分别测定样品常规营养成分、NSP含量及SDGE、SDDM和仿生能量利用率,选择NSP含量最高且SDDM和仿生能量利用率最低的小麦样品探究NSP酶酶谱。第三部分根据第一部分得到的消化参数及第二部分的NSP酶酶谱采用体外法探究NSP酶在小麦及小麦日粮中的应用。结果表明:(1)温度对4种木聚糖酶和3种β-葡聚糖酶的相对酶活均有显著影响,木聚糖酶A、B、C和β-葡聚糖酶III相对酶活均在39℃时最高,并显著高于41℃、42℃处理组(P0.05),两者均显著高于41℃和42℃处理组(P<0.05)。胃期p H对木聚糖酶A、B、C和β-葡聚糖酶I、III有显著影响(P0.05);p H为3.5时木聚糖酶A、B的相对酶活最高,并显著高于其他p H处理组(P<0.05);在木聚糖酶C和β-葡聚糖酶III中,p H 2.5、3.0和3.5处理组间的相对酶活无显著差异,但均显著高于p H 2.0处理组(P0.05),但均显著高于p H2.0、2.5处理组(P<0.05)。肠期p H对木聚糖酶D和β-葡聚糖酶I、II、III的相对酶活有显著影响(P0.05);木聚糖酶D的p H 6.5、7.5处理组的相对酶活差异不显著,p H 7.5组的相对酶活显著高于p H 7.0、8.0组;β-聚糖酶II的p H 6.5、7.0处理组间差异不显著,均显著高于其他组;β-聚糖酶III在p H 6.5时相对酶活最高,且显著高于其他处理组(P0.05)。当木聚糖酶添加量为17000 U/kg、β-聚糖酶添加量为2500 U/kg时,小麦净还原糖释放量达最大值。(3)仿生消化试验中,NSP酶显著提高了小麦的SDGE、SDDM和仿生能量利用率(P<0.05),分别为2.26 MJ/kg、11.81%和12.75%(P<0.05)。在小麦-玉米-豆粕型饲粮中,NSP酶组的SDGE、SDDM和仿生能量利用率显著高于对照组(P<0.05),SDGE提高了0.85 MJ/kg,SDDM和仿生能量利用率分别提高了2.44%和4.32%(P0.05)。综上,体外评估NSP酶的适宜参数温度为39℃,胃肠期p H分别为3.5和6.5;木聚糖酶和β-葡聚糖酶的添加量分别为17000 U/kg和2500 U/kg时小麦净还原糖释放量达最大值;NSP酶可显著提高小麦和小麦豆粕日粮的SDGE、SDDM和仿生能量利用率。
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