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荧光分析方法具有较高的灵敏度,较好的选择性,并且仪器设备简单,可以实现对痕量物质的快速检测,因此在化学、生物、医学和工业等研究中有重要的应用。近年来,新型荧光探针材料的设计和制备,使得荧光分析方法在痕量物质检测方面的应用更加广泛。本文利用新型有机荧光探针和量子点荧光探针两种荧光材料,分别实现了对铁离子和生物分子谷氨酸脱氢酶的快速,高灵敏的检测,可以应用到生物和化学体系的研究中。
第一章主要从荧光分析法的基本原理和基本方法,荧光材料的类型,以及金属离子的荧光检测分析三个方面进行介绍。其中荧光材料部分介绍了有机染料、纳米荧光材料和生物荧光分子的相关知识。金属离子的荧光检测分析主要介绍了细胞内锌、铜和铁的检测。
第二章,我们设计了一种新型的基于丹磺酰氯的绿色荧光探针,该荧光探针具备光稳定性强,水溶性好,对环境不敏感等特性。此荧光分子对三价铁离子具有高的选择性,其对Fe3+的特异性响应不受其他金属离子的干扰。同时,我们制备的荧光探针可以很好的区分Fe3+和Fe2+,对Fe3+的检测限为0.62μM,这个浓度要远低于饮用水规定的5.4μM上限,可用于饮用水中铁离子的检测。我们应用该探针测定自来水中的铁离子浓度,恢复性实验证明,新型荧光探针具有较好的恢复性。通过实验证明,我们设计的有机荧光探针具备高效的发光性,较好的生物相容性和优良的光稳定性,可用于化学和生物体系的研究中。
第三章,我们合成了水相的CdTe绿色量子点,利用量子点与生物化学中的酶催化反应相结合,实现了对生物催化酶分子的检测。NAD+作为谷氨酸脱氢酶(GLDH)的辅因子,可以通过电子转移途径淬灭量子点的荧光。量子点的荧光会因为NAD+的消耗而恢复,从而可以间接测定酶分子的含量。用CdTe量子点可以检测较宽浓度范围的GLDH,10 U/L至1000 U/L,这个浓度区间在临床诊断中有重要的应用。