MGMT基因表达与人脑胶质瘤化疗耐药关系研究

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该研究分为两大部分.1.细胞株和胶质瘤标本体外药物敏感性检测.采用MTT法我们首先对11个人脑胶质瘤细胞株进行了顺铂(DDP)、榄香烯(Elemene)、甲环亚硝脲(MeCCNU)、常春新碱(VCR)、威猛(VM-26)和足叶乙甙(VP-16)等六种脑肿瘤常用化疗药物的体外敏感性测定.11个细胞株分别是:MGR-1、MGR-2、MGR-3、SF295、SF767、SKMG-1、SKMG-4、T98-G、UW28、UWR-7和SHG-44.同时我们对中山大学肿瘤医院神经外科手术的恶性脑肿瘤常规进行体外药物试验,从2001年7月至2003年4月共做药敏试验94例.药敏结果分别以血浆峰浓度(PPC)下的肿瘤生长抑制率(IR﹪)和抑制50﹪肿瘤细胞生长的药物浓度(IC<,50>)表示.2.胶质瘤标本MGMT基因表达检测及与药敏相关性分析.在获得体外药敏试验结果的48个病例中,选择胶质瘤标本(34例),采用Trizol提取总RNA,其中的26个病例的总RNA为有效标本,进行基因表达检测.具体采用RT-PCR方法检测MGMT的表达,随后将肿瘤标本中的MGMT表达与体外药敏试验结果进行相关性分析.结论:1.用MTT法检测细胞株及胶质瘤原代细胞体外药敏试验,简便、快速、易标准化、有效可行、有较好的重复性,可以用来检测临床标本在体外对不同药物的敏感性.2.11个人胶质瘤细胞株对所检测的6种药物比较敏感,每个细胞株至少有两种药物对其敏感;而34例临床标本对这些抗癌药物敏感性相对较低,对其中任何一种药物敏感的病例不到半数.临床标本的药敏试验结果可以作为指导临床个体化化疗的一个有效参考,用来排除不敏感药物.3.临床标本中,多数有MGMT mRNA的表达,其强弱有较大的差异.4.MeCCNU和DDP的IC<,50>和MGMT的mRNA之间有显著的相关性,支持MGMT基因表达与胶质瘤对烷化剂类耐药相关.因此,检测MGMT的表达可以为临床脑肿瘤病人个体化化疗提供参考.
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