随着人们对酶标准化工作和计量学溯源体系的深入认识,参考方法、参考物质和参考实验室网络的结合成为国内外普遍认可的实现酶活性测定标准化的重要途径,而使用公认的酶校准物作为载体,将测定结果的数值在参考方法和常规方法间进行准确性的传递是目前酶标准化工作的关键环节之一。虽然我国的室间及室内质量控制工作在临床实验室中已广泛开展,酶校准品的应用价值也更受关注,但目前我国使用的酶校准品和质控品基本依赖进口,价格昂贵,在不同的测定仪器和试剂上应用时受到互通性限制。所以,对于我国的酶标准化工作来说,实现参考物质的国产化是目前面临的重要课题。本文谷氨酰基转移酶(GGT,EC2.3.2.2)是从猪肾皮质中提取的。经过匀浆,DOC溶解和硫酸铵分级沉淀粗提取,木瓜蛋白酶的消化酶解,再经过脱盐、DEAE阴离子交换层析和Superdex 75 pg凝胶层析,得出高比活高纯度的GGT样品。该样品应为猪肾皮质全分子的水溶性轻链,分子量为21kD,纯化后的比活为124 U/mg。经SDS-PAGE电泳检验,为单一条带,证明样品高纯度。初步建立了GGT参考测定方法,并对纯化后蛋白的保存基质进行了稳定性和互通性研究。初步的观察结果表明,120天内,4℃和-20℃时GGT在CRM基质和自制基质中保持稳定,37℃下活性浓度损失均小于5%;在人血清基质中4℃保存的样品40天内活性浓度下降15.2%,37℃保存的样品在15天内活性下降1.9%,40天内下降39%。在两种常规方法和参考方法的比较中,仅CRM基质的高值样本偏于95%可信区间。说明提纯的GGT具有良好的互换性,该样品具有良好的应用前景,特别是自制基质和CRM基质的样品溶液,可作为候选校准品应用于临床检测。