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研究目的胰腺癌（Pancreatic Ductal Adenocarcinoma,PDAC）作为消化系统中预后最差的疾病之一,由于缺少敏感性高、特异性好的诊断指标,并且早期无特异性临床表现,因此在发现是往往已达到晚期,即便进行化疗、放疗及手术治疗,其五年生存率依旧很低。溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶4（Lysophosp hatidylcholine acyltransferase,LPCAT4）具有溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶（LPC AT）活性,属于溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶（LPCAT）家族,现已被证明通过重塑癌细胞的脂质成分参与了结肠癌、肝癌的发生发展。本次研究通过数据库分析及基础实验,共同探索了LPCAT4在胰腺恶性肿瘤中的表达,进行了与临床病理数据的相关性分析,为胰腺恶性肿瘤的诊治提供了新的方向。方法1生物信息学分析本研究首先通过HPA数据库探索了LPCAT4在各个正常器官中的表达,随后通过Oncomine数据库、GENT2.0数据库、GEPIA2.0数据库分析了LPCAT4在泛癌及相对应癌旁之间的差异表达;c Bio Portal数据库探索了LPCAT4在胰腺恶性肿瘤中的突变情况;TIMER数据库分析了LPCAT4与免疫浸润的关系;TCGA数据库和GTEx数据库分析了LPCAT4表达与患者病理分级、存活率之间的关系;Kaplan-meier Plotter分析了LPCAT4表达与患者预后之间的关系。2基础实验分析为了证实LPCAT4在胰腺恶性肿瘤中的表达,我们通过RT-PCR对LPCAT4进行m RNA水平上的验证;Western Blot进行蛋白层面上的验证;随后收集胰腺恶性肿瘤患者术后病理标本、收集我院HIS系统中患者临床病理资料,通过免疫组织化学染色分析了LPCAT4表达与临床病理资料之间的关系。结果1 HPA数据库提示LPCAT4在各个人体正常器官中m RNA和蛋白水平均有表达,但是表达量低。Oncomine数据库提示LPCAT4在膀胱癌、食管癌、肾癌、肺癌、淋巴瘤及胰腺癌中均差异表达（p＜0.05）。GENT2.0数据库中再次验证LPCAT4在眼部、淋巴结、肾脏及胰腺等多数肿瘤中均有过表达。其中LPCAT4在胰腺癌及癌旁中的表达具有显著差异（p＜0.001）。2 TCGA及GTEx数据库提示,相比LPCAT4基因在正常胰腺组织中的表达水平,胰腺癌组织中LPCAT4的表达水平明显增加（p＜0.001）;胰腺癌死亡组中LPCAT4的表达水平高于存活组（p＜0.05）;根据胰腺癌病理分级,G2及G3期胰腺癌中LPCAT4的表达均高于G1期（p＜0.001）。3 cBioportal数据库提示LPCAT4的差异表达与基因突变有关,在415例胰腺癌患者中有8例发生了基因突变（3例错义突变、3例基因缺失及2例基因扩增）,其中在蛋白层面中LPCAT4在酰基转移酶结构域处发生了两处突变。4 TIMER2.0数据库提示LPCAT4与MDSCs（p＜0.05）、B细胞（p＜0.05）的浸润呈正相关;LPCAT4与CD8+T细胞（p＜0.05）、NK细胞（p＜0.05）的浸润呈现一个负调控的关系。5 Kaplan-meier Plotter数据库提示LPCAT4高表达与总体生存期（p＜0.001）、无进展生存期（p＜0.001）、疾病特异性生存期（p＜0.05）呈负相关。6 RT-PCR提示相比LPCAT4 m RNA在正常胰腺导管上皮细胞的表达量,胰腺导管腺癌细胞株中的表达量明显高于正常胰腺导管上皮细胞（p＜0.05）,其中在胰腺导管腺癌细胞株中MIA-Pa Ca-2的LPCAT4 m RNA表达水平最高（p＜0.001）。7 Western Blot提示相比LPCAT4蛋白在正常导管上皮细胞中的表达量,胰腺导管腺癌细胞株中的表达量明显高于正常胰腺导管上皮细胞（p＜0.05）,但是在胰腺导管腺癌细胞株中CFPAC-1的蛋白表达量较正常胰腺细胞的低,无统计学意义。8免疫组织化学染色提示LPCAT4蛋白在胰腺导管腺癌组织中的表达较癌旁组织中的高（p＜0.001）。其中LPCAT4的表达水平与远处转移（p＜0.01）、肿瘤的分化程度（p＜0.01）、病理分期（p＜0.05）以及CA19-9（p＜0.01）相关。9 Kaplan-Meier生存曲线提示,LPCAT4蛋白表达水平高的患者生存期明显降低（p＜0.0001）,LPCAT4蛋白表达水平表达高的患者中位生存期仅为10.1个月。10 ROC曲线（受试者工作特征曲线）提示LPCAT4基因在预测胰腺癌时具有较好的诊断价值,其AUC（曲线下面积）为0.973,具有较高的预测能力。11单因素Cox回归分析提示淋巴结转移（HR:5.343,95%CI:1.754-16.274,p＜0.01）、远处转移（HR:2.697,95%CI:1.169-6.227,p＜0.05）、CA19-9（HR:1.001,95%CI:1.000-1.003,p＜0.05）、AFP（HR:1.113,95%CI:1.019-1.215,p＜0.05）、LPCAT4（HR:3.988,95%CI:1.966-8.089,p＜0.001）是影响胰腺癌预后的因素。12多因素Cox回归分析结果提示,淋巴结转移（HR:5.591,95%CI:1.670-18.721,p＜0.01）、及LPCAT4的表达量（HR:3.055,95%CI:1.352-6.903,p=0.007）可以作为判断胰腺癌不良预后的独立危险因素。结论LPCAT4基因在胰腺导管腺癌细胞株及组织中高表达,在正常胰腺细胞及胰腺组织中低表达;胰腺癌患者组织中LPCAT4蛋白的表达水平高,预后更差;LPCAT4基因具有较高的诊断价值;LPCAT4蛋白高表达是影响胰腺癌患者预后的独立危险因素;LPCAT4在胰腺癌中与免疫抑制及促进胰腺恶性肿瘤免疫逃避相关。总之,LPCAT4与胰腺癌的发生及预后密切相关,有可能是治疗胰腺癌的新型生物靶点。