常见海蛇抗毒血清的制备及其应用研究

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我国东南沿海主要海洋有毒有害生物调研结果表明,海蛇伤是最常见,最严重的海洋生物伤之一。由于没有特效的解毒剂,海蛇伤成为影响海洋开发、我军海上作业和跨海登岛作战的卫生保障常见问题。我国沿海共有9属16种海蛇,主要生活在南海、北部湾以及海南、台湾、广西、广东和福建等省沿海海域,以海蛇亚科和扁尾海蛇亚科为主。海蛇在交配季节和受到攻击时会主动袭击人类。被海蛇咬伤后,如无特效抗毒血清,约80%患者48h内死于呼吸衰竭。目前我国对海蛇咬伤的治疗仅限于对症处理,无特效抗海蛇毒血清产品,同时抗陆地蛇毒血清对海蛇咬伤无显著疗效,因而每年都有海蛇咬伤致死的病例报道。 目的: 以我国沿海常见海蛇种属青环海蛇毒素为免疫原,进行抗青环海蛇毒素血清制备及其急救应用研究。为解决沿海常见海洋有毒有害生物伤提供确实有效的医疗保障。 方法: 1、青环海蛇断头后分离毒腺经冷冻干燥后获得。毒素用2%甲醛减毒和灭菌处理后,辅以佛氏佐剂,对新西兰兔进行免疫。免疫期间以免疫双向扩散和酶联免疫吸附实验检测效价。效价达到标准后动物取血,分离血清。 2、血清用硫酸铵盐析和免疫亲和层析进行纯化。纯化后血清对小鼠进行体内体外试血试验和交叉试血实验,评价血清中和能力。 3、建立海蛇咬伤模型,40只新西兰兔随机分为对照组、中毒后0.5h、2h及4h经静脉给予足量抗海蛇毒血清组,各组分别在中毒前,中毒后0.5h、1h、2h、3h、4h、5h、6h、7h、8h、10h各时间点测定以下生理生化指标:HR、SBP、DBP、RR、RI、ALT、LDH、CK、UREA、CR、PaO2、PaCO2、PH、SaO2,以及心电图和血电解质(K+、Na+、)的变化,以研究探讨抗青环海蛇毒血清对海蛇咬伤早期急救方法和效果评价。
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