Ghrelin促进绵羊卵母细胞体外成熟及对早期胚胎发育的影响

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Ghrelin作为G蛋白偶联型受体的天然内源性配体。在动物体各组织器官分布广泛,功能作用较多。在绵羊卵巢中也存在。已有研究结果证实Ghrelin在动物卵母细胞、颗粒细胞、黄体细胞中都有表达,并且Ghrelin对卵母细胞、早期胚胎发育具有重要作用。本实验用绵羊卵母细胞作为实验材料,探索Ghrelin介导下卵母细胞在体外成熟不同时期对细胞周期调控作用,促进卵母细胞成熟的相关机理以及Ghrelin对早期胚胎发育的影响进行研究。结果如下:添加200ng/mL Ghrelin对绵羊卵母细胞体外成熟培养成熟率具有提高作用(P<0.01)、体外成熟时间具有加速作用(P<0.01)。Ghrelin促进绵羊卵母细胞核成熟过程,转录组学分析表明:Ghrelin通过介导细胞周期、卵母细胞减数分裂中ERK1、ERK2、CCNB2、CCNB3等信号通路的基因差异表达(P<0.05)实现促进作用。添加Ghrelin获得的体外成熟绵羊卵母细胞,受精后胚胎发育情况显示:Ghrelin并未改变早期胚胎发育顺序。Ghrelin降低了早期胚胎的卵裂率(P<0.05)。验证发育相关基因GLUT1表达情况显示:Ghrelin介导GLUT1表达下调(P<0.05)。结论:Ghrelin加速卵母细胞体外培养成熟,并通过介导细胞分裂差异基因ERK1、ERK2、CCNB2、CCNB3等通过PI3K-Akt+MAPK复合信号通路、Cell Cycle+MAPK实现;预测Ghrelin通过介导GLUT1基因在早期胚胎发育进程中下调表达,进而降低早期胚胎质量和进一步发育能力。
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