安全、有效、质量可控是药物制剂的基本特性。稳定性则是保证安全和有效的重要条件。中药制剂在制备和贮存过程中,因受到外界因素的影响,易发生变质,导致药效降低,毒性增大,影响药物制剂的治疗效果。所以从药物制剂的生产到使用,都需要研究稳定性。通过稳定性试验,考察中药在不同条件下药品随时间变化的规律,为认识药品的稳定趋势提供科学依据。中药制剂是指以中医药理论为指导,以中药材为原料,按规定的处方和工艺加工成一定剂型的、供临床使用的药物。现有关于中药制剂稳定性的研究基本上沿用单一活性成分或指标成分作为控制质量的指标进行考察。中药制剂成分极为复杂,含多种活性成分,难以用其中一两种有效化学成分加以表征。因为中药是在中医理论指导下使用的,按方配伍、按量配伍是中药的特点。多指标量的变化可以反映中药配伍的变化,在一定程度上反映中药制剂功效的变化。所以选择中药中代表不同类成分的多个组分同时考察,通过研究多组分随时间量的变化和比例的变化考察中药制剂的动态稳定性,更加科学。毛细管电泳技术(capillary electrophoresis;CE)具有多种分离模式,通过模式的选择,可同时分析不同性质的成分,特别适用于由多种药材组成的含有大量不同种类成分的中药复方制剂的分析。本文采用CE法对中药制剂多指标成分检测方法和中药制剂的稳定性进行了研究:利用CE分析方法测定了小儿清热止咳口服液、柴连口服液、清开灵口服液等制剂中多种成分的含量,建立了适合中药制剂多指标成分的分析方法,为研究中药制剂稳定性建立基础;通过考察双黄连口服液和银黄口服液的多指标成分含量和组分间相对比例随时间的变化,探讨中药制剂在高温影响因素试验下能否保持多种组分的相互配伍作用。研究结果表明:(1)具有多分离模式的CE法可以同时分离测定中成药中的各类成分,适合用于中药制剂的稳定性研究。(2)高温影响因素会对双黄连口服液和银黄口服液中各组分含量的变化和组分间相对比例的变化产生较大的影响,使中药多组分的相互作用发生了变化,根据中医配伍理论,中药制剂的功效也发生了相应变化。一、CE法测定中药制剂中多指标成分的研究(一)CE方法测定小儿清热止咳口服液中麻黄碱、黄芩苷和甘草酸目的:通过建立CE法测定小儿清热止咳口服液中麻黄碱、黄芩苷和甘草酸的含量,为CE法能较好的评价和控制复方中药的质量提供依据,为研究中药制剂稳定性建立基础。方法:以未涂层弹性融硅毛细管(50cm×50μm,有效分离长度45cm)为分离通道,25mmol·L-1硼砂缓冲液(pH 8.60)作为电泳介质,压力进样,进样时间6s,运行电压10kV,检测波长192nm。结果:麻黄碱、黄芩苷、甘草酸分别在4.00×10-3~0.225mg·mL-1、2.40×10-3~1.50mg·mL-1、2.10×10-2~1.33 mg·mL-1质量浓度范围内线性关系良好,3者加样回收率分别为98.3%、98.4%、97.1%。结论:CE法同时测定中药制剂中的多组分简便、快速,结果准确,可用于中药制剂的质量控制,可作为稳定性研究的分析手段。(二)CE方法测定柴连口服液中麻黄碱、伪麻黄碱、芦丁和肉桂酸目的:利用CE法测定柴连口服液中盐酸麻黄碱、伪麻黄碱、芦丁和肉桂酸的含量,为CE法能较好的评价和控制复方中药的质量提供依据,为研究中药制剂稳定性建立基础。方法:利用毛细管区带电泳紫外检测法测定4个指标成分的含量,并研究了各种条件的影响,得到了优化的试验条件:以未涂层弹性石英毛细管(40cm×50μm,有效分离长度35cm)为分离通道,25mmol·L-1硼砂缓冲液(pH8.50)-乙醇10:1作为电泳介质,压力进样,进样时间5s,运行电压10kV,检测波长192nm。结果:盐酸麻黄碱、伪麻黄碱、芦丁和肉桂酸分别在30.0~196μg·mL-1、51.0~328μg·mL-1、43.0~276μg·mL-1、31.0~204μg·mL-1质量浓度范围内线性关系良好,相关系数均不低于0.9987,回收率均在98.3%~99.4%范围内。结论: CE法同时测定中药制剂中的多组分简便、快速,结果准确,可用于中药制剂的质量控制,可作为稳定性研究的分析手段。(三)CE方法测定清开灵口服液中黄芩苷和绿原酸目的:通过清开灵口服液中黄芩苷和绿原酸含量测定的毛细管电泳法的建立,为CE法能较好的评价和控制复方中药的质量提供依据,为研究中药制剂的稳定性建立基础。方法:利用毛细管区带电泳紫外检测器测定黄芩苷和绿原酸的含量。电泳条件:以未涂层弹性融硅毛细管(40cm×50μm,有效分离长度35cm)为分离通道,25mmol·L-1硼砂缓冲液(pH8.50)作为电泳介质,压力进样,进样时间5s,运行电压15kV,检测波长254nm。结果:黄芩苷和绿原酸分别在0.119~7.62mg·mL-1、3.40×10-2~2.18mg·mL-1质量浓度范围内线性关系良好,相关系数均不低于0.9992。加样回收率分别为100.2%、97.1%。结论:CE法同时测定中药制剂中的多组分简便、快速,结果准确,可用于中药制剂的质量控制,可作为稳定性研究的分析手段。二、CE法研究中药制剂的稳定性(一)CE法研究双黄连口服液的稳定性目的:建立一种双黄连口服液中绿原酸、黄芩苷和连翘苷含量测定的毛细管电泳方法,以此方法为检测手段,考察在高温下上述3种成分含量及相对比的变化。方法:按照中药、天然药物指导原则三(一)项下高温试验方法,将供试品置于密封洁净容器中,在60℃条件下放置10天,于0、5、10天取样,检测相关指标绿原酸、黄芩苷和连翘苷的含量。与0天比较,考察上述成分含量的变化及相对量比例的变化。电泳条件毛细管:40cm×50μm(有效长度35cm);电泳介质:40mmol·L-1硼砂-40mmol·L-1SDS溶液(pH 8.30)-10%乙腈;电压:10kV;电流:约8μA;检测波长:192 nm。结果:通过10天的考察,3批样品中绿原酸、黄芩苷和连翘苷含量均有不同程度的下降,且下降速度不同。黄/连、绿/连的比值亦有变化。结论:在中医理论指导下使用的中药制剂疗效的发挥是多种组分相互作用的结果。双黄连口服液在60℃下放置10天,代表全部3种药材的指标成分绿原酸、黄芩苷和连翘苷含量均有下降,同时相对比例亦产生了变化。中药多组分的相互配伍作用发生了变化,不符合中医配伍理论,进而影响中药制剂的安全和疗效。(二)CE法研究银黄口服液的稳定性目的:建立一种银黄口服液中绿原酸和黄芩苷含量测定的毛细管电泳方法,以此方法为检测手段,考察在高温下上述3种成分含量及相对比的变化。方法:按照中药、天然药物指导原则三(一)项下高温试验方法,将供试品置于密封洁净容器中,在60℃条件下放置10天,于0、5、10天取样,检测相关指标黄芩苷和绿原酸的含量。与0天比较,考察上述成分含量的变化及相对量比例的变化。电泳条件毛细管:40cm×50μm(有效长度35cm);电泳介质:40mmol·L-1四硼酸钠溶液(pH8.30);电压:20kV;检测波长:310nm。结果:通过10天的考察,3批样品中黄芩苷和绿原酸含量均有不同程度的下降,且下降速度不同。黄/连、绿/连的比值亦有变化。结论:在中医理论指导下使用的中药制剂疗效的发挥是多种组分相互作用的结果。银黄口服液在60℃下放置10天,代表全部2种药材的指标成分黄芩苷和绿原酸含量均有下降,同时相对比例亦产生了变化。中药多组分的相互配伍作用发生了变化,不符合中医配伍理论,进而影响中药制剂的安全和疗效。