【摘 要】
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目的:建立一个稳定可靠的小鼠眼表二氧化硅颗粒（微米级）损伤模型,以便深入研究这一主要大气污染物对小鼠眼表的损伤表现及毒理作用。方法:将二氧化硅颗粒（微米级）溶于PBS中配制成悬浊液,使用专门的小鼠头部固定装置麻醉并固定小鼠,然后进行悬浊液对眼表的长时间接触性处理,建立眼表二氧化硅颗粒损伤模型。造模完毕后分别行裂隙灯显微镜、荧光素钠染色及评分、光学相干断层扫描、小鼠泪液分泌量测量、活体共聚焦显微镜观
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目的:建立一个稳定可靠的小鼠眼表二氧化硅颗粒（微米级）损伤模型,以便深入研究这一主要大气污染物对小鼠眼表的损伤表现及毒理作用。方法:将二氧化硅颗粒（微米级）溶于PBS中配制成悬浊液,使用专门的小鼠头部固定装置麻醉并固定小鼠,然后进行悬浊液对眼表的长时间接触性处理,建立眼表二氧化硅颗粒损伤模型。造模完毕后分别行裂隙灯显微镜、荧光素钠染色及评分、光学相干断层扫描、小鼠泪液分泌量测量、活体共聚焦显微镜观察、角膜及角膜上皮修复试验等实验室检查,随后取材、固定、包埋,进行眼球冰冻切片苏木素-伊红染色、PAS染色,Ki67免疫荧光染色,以及炎症因子的相关PCR实验。结果:裂隙灯显微镜检查与光学相干断层扫描检查显示,实验组出现角膜上皮的缺损及角膜水肿增厚;泪液分泌量实验显示实验组小鼠泪液分泌量明显降低;在冰冻切片染色结果中除了观察到以上角膜上皮的变化,还发现有明显的炎症细胞浸润;活体共聚焦显微镜结果进一步定位了炎症的程度和位置,并确定了颗粒物沉着于角膜;PCR结果显示在实验组中TNF-α、IL-1β、IL-13和NF-κB等炎症因子水平明显上升。结论:本课题首次采用颗粒悬液浸没的接触方法构造眼表损伤的动物模型。通过对该模型的研究,我们发现微米级的二氧化硅悬液浓度达到5%时,会造成明显的眼表形态学改变。同时还会附着于角膜上进行长期的接触性磨损,造成角膜上皮及基质的损伤和炎症细胞浸润,并且会促进细胞的增殖功能。
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