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目的基于Nrf2/HO1信号通路探讨温阳通脉方含药血清保护H9c2心肌细胞缺氧/复氧（H/R）后氧化应激损伤机制。方法实验一:制备大鼠的空白血清和温阳通脉方的含药血清,以H9c2心肌细胞为研究对象,将细胞分组:空白血清组（CON组）,模型组（H/R组）,低、中、高剂量的温阳通脉方含药血清组（L组、M组、H组）,用Co Cl2及新鲜培养基制备缺氧/复氧（H/R）模型后各组添加相应的血清。用CCK-8法检测5组细胞活性;比色法检测5组细胞丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、乳酸脱氢酶（LDH）的含量。DCFH-DA探针法检测细胞活性氧（ROS）的水平;Western Blot法检测低氧诱导因子（Hif-1α）、核因子NF-E2相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶-1（HO-1）的蛋白表达;Hoechst33342荧光染色法检测细胞凋亡率和形态学变化。实验二:基于实验一的结果,筛选出高剂量的温阳通脉方含药血清组保护作用最佳。将细胞分为空白血清组（CON组）、模型组（H/R组）、高剂量温阳通脉方含药血清组（H组）和ML385组（用5μM的ML385预处理12小时）,缺氧/复氧后,CON组和H/R组添加空白血清,H组和ML385组添加高剂量血清孵育4小时。检测4组细胞活性、MDA、SOD、LDH含量、ROS水平,Hif-1α、Nrf2、HO-1的蛋白表达、检测细胞凋亡情况（检测方法同实验一）,同时检测Nrf2核易位情况。统计学分析各指标变化情况,以分析阻断Nrf2后HO1表达和心肌细胞氧化应激损伤指标的变化,以及细胞凋亡的变化。结果实验一:与CON组比较,H/R组细胞活性降低（P＜0.05）,MDA、LDH、ROS含量增高（P＜0.05）,SOD含量降低（P＜0.05）。Hif-1α（P＜0.05）、Nrf2、HO-1蛋白表达增加;H/R组核碎裂细胞增加,凋亡率增加（P＜0.05）。与H/R组比较,L组、M组、H组均能不同程度改善缺氧/复氧损伤H9c2细胞活性（P＜0.05）,减少MDA、LDH含量（P＜0.05）,减少ROS含量（L组P＞0.05,M、H组P＜0.05）,各组均能增加SOD含量（P＜0.05）,减少Hif-1α表达（P＜0.05）,增加Nrf2（H组P＜0.05）、HO-1蛋白表达（M、H组P＜0.05）。减少不规则形态和核碎裂细胞,减少凋亡率（L、M及H组P＜0.05）。温阳通脉方三组比较:H组减少MDA、LDH、ROS,增加SOD含量,优于L、M组（P＜0.05）。H组增加Nrf2、HO-1、减少Hif-1α蛋白表达,与L、M组比较无统计学差异（P＞0.05）。实验二:与CON组比较,H/R组细胞活性降低（P＜0.05）,MDA、LDH、ROS含量增高（P＜0.05）,SOD含量降低（P＜0.05）。Hif-1α（P＜0.05）、Nrf2、HO-1蛋白表达增加（P＜0.05）;H/R组核碎裂细胞增加,凋亡率增加（P＜0.05）。核Nrf2表达增加（P＜0.05）。与H/R组比较,H组能改善缺氧/复氧损伤H9c2细胞活性,减少MDA、LDH、ROS含量,减少Hif-1α表达,减少凋亡率（P＜0.05）;增加SOD含量,增加Nrf2、HO-1蛋白表达（H组P＜0.05）。核内Nrf2表达增加（P＜0.05）。与H/R组比较,ML385组（抑制Nrf2后）不能改善细胞活性（P＞0.05）。能减少MDA、LDH、ROS含量,减少Hif-1α表达;增加SOD含量。但Nrf2、HO-1蛋白表达没有增加（P＞0.05）,凋亡率没有减少（P＞0.05）。核Nrf2表达没有增加（P＞0.05）。与H组比较,ML385组在减少MDA、LDH、ROS、Hif-1α表达和增加SOD表达方面低于H组（P＜0.05）。结论温阳通脉方低、中、高剂量含药血清均能提高缺氧/复氧后H9c2细胞活性,降低细胞缺氧/复氧后的LDH、ROS、MDA,改善低氧状态（降低Hif-1α表达）,上调Nrf2/HO-1通路蛋白表达及细使缺氧后的胞核内Nrf2增加,改善细胞凋亡,其作用以高剂量作用较显著。经Nrf2/HO-1通路抑制后,温阳通脉方上调Nrf2/HO-1通路蛋白表达及核易位作用消失,其改善缺氧/复氧后H9c2细胞活性及细胞凋亡作用消失。温阳通脉方仍能降低细胞缺氧/复氧后的LDH、ROS以及MDA,改善低氧状态,但作用明显低于没有Nrf2/HO-1通路抑制的温阳通脉方高剂量组,差异有显著性。温阳通脉方能够保护缺氧/复氧后H9c2细胞过氧化损伤,参与保护心肌细胞凋亡,分子机制与Nrf2/HO-1通路相关。