目的:研究25℃冷敏感的瞬时受体电位通道TRPM8是否可减轻心肌缺血再灌注损伤而成为一个潜在发挥心肌保护作用的药物作用靶点,并对其作用机制进行探讨。方法:40只雄性SD大鼠(200g-220g)被随机分为25℃低温缺血再灌注组(25℃+I/R)、37℃缺血再灌注组(37℃+I/R)、25℃低温再灌注加TRPM8阻断剂BCTC组(25℃+BCTC+I/R)和37℃再灌注加TRPM8激动剂Icilin组(37℃+Icilin+I/R),每组10只。设立25℃+IR与25℃+BCTC+IR组的目的是观察25℃低温再灌注是否可以起到心肌保护效果,且该保护效果是否通过激活TRPM8发挥作用;设立37℃+IR与37℃+Icilin+IR组的目的是观察在机体正常体温37℃再灌注时,药物激活TRPM8是否同样可以起到心肌保护作用。应用Langendorff离体心脏灌流装置对各组大鼠离体心脏全心停灌30 min,再灌注120 min造成心肌缺血再灌注损伤模型。应用Western blot和实时定量PCR技术检测TRPM8在心肌组织中的表达,检测心肌组织中Bcl-2、Bax、磷酸化caspase-3、Rho A和ROCK2的蛋白表达;紫外-可见分光光度法检测心脏灌流液中乳酸脱氢酶(LDH)活力、心脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;TTC染色检测心脏的梗死面积;Lab Chart生理信号记录仪监测心脏的左心室发展压(LVDP),左心室舒张末压(LVEDP),和左心室压最大上升/下降速(+dp/dtmax/-dp/dtmax);HE染色观察各组心肌石蜡切片的基本形态;TUNEL凋亡染色法检测心肌细胞的凋亡情况。结果:(1)SD大鼠心肌中TRPM8在蛋白和m RNA水平均有表达。(2)与37℃的再灌注相比,25℃低温再灌注时心脏梗死面积显著降低(P<0.01),心脏灌脉流出液中LDH含量显著降低(P<0.01)、心脏LVDP明显升高(P<0.01)、LVEDP明显降低(P<0.05)±dp/dtmax明显升高(P<0.01)。(3)与在37℃的再灌注相比,25℃低温再灌注时心肌组织中MDA含量显著降低(P<0.05),而SOD活性显著增加(P<0.05),心肌细胞的凋亡指数也明显降低(P<0.01);(4)与37℃的再灌注相比,25℃低温再灌注时心肌组织中Bax和磷酸化caspase-3的表达均显著下降(P<0.01),而Bcl-2的表达显著升高(P<0.05),Rho A和ROCK2的表达均显著下降(P<0.01)。当25℃低温再灌注时加入TRPM8阻断BCTC(8μmol/L),上述各项指标发生与37℃的再灌注相似改变,而37℃的再灌注时加入TRPM8激动剂Icilin(2μmol/L)时,上述各项指标发生与25℃低温再灌注相似改变。结论:在心肌缺血后再灌注过程中,激活心脏TRPM8可通过抑制Rho A/ROCK2信号通路减轻心肌氧化应激和抑制心肌细胞的凋亡而提供心肌保护作用,提示冷敏TRPM8通道可作为潜在药物作用靶点减轻心肌缺血再灌注损伤。