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番茄灰霉是由灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)引起的一种世界性的真菌病害,严重影响番茄的产量和品质。目前,由于化学防治自身存在的缺陷,且灰葡萄孢菌对常用的化学药剂产生了普遍的抗药性,加之科研工作者尚未选育出抗番茄灰霉的品种应用至田间种植,对番茄灰霉的生物防治研究便成为一种较优的选择途径。本实验室从秦岭原始森林土壤中分离筛选到菌株Ba168,结合菌株形态和菌落培养特征观察、常规生理生化反应和16SrDNA同源序列比对分析等鉴定其为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。该菌对灰霉病菌具有较强的拮抗活性。本研究的内容主要包括以下两个方面:(1)解淀粉芽孢杆菌Ba168发酵产抗菌活性物质条件的优化。首先,通过绘制解淀粉芽孢杆菌Ba168菌株的生长曲线,确定其发酵的接种种龄为20-23h。其次,探索发酵液中芽孢数量与抗番茄灰霉活性的联系,结果表明两者呈正相关。然后,以芽孢数量为衡量指标,综合运用单因子实验、Plackett-Burman设计、最陡爬坡实验和Box-Behnken中心组合实验和响应面分析法等方法对Ba168菌株的发酵条件进行优化,确定其最优培养条件为:玉米粉1%,黄豆饼粉1.76%,KH2PO40.11%,MgSO40.05%,起始pH值7,接种时间20h,接种量5.77%,培养温度32℃,摇床转速220r/min,培养时间48h。最后,比较了发酵条件优化前后的产芽孢数和抗灰霉活性。研究结果表明,菌株Ba168发酵条件优化后,提高了其发酵液对番茄灰霉病菌的拮抗活性。(2)菌株Ba168可湿性粉剂的毒力和药效的测定。首先,采用平板对峙法测定Ba168WP对15种病原真菌的拮抗作用,其抑菌平均直径为18.61mm~26.38mm。其次,采用菌丝生长速率法分别测定Ba168WP、枯草芽孢杆菌10亿活芽孢/克WP、40%多菌灵WP、50%异菌脲WP和40%嘧霉胺WP等5种杀菌剂对于番茄灰霉菌丝生长的抑制作用,其EC50依次为946.28ug/mL、757.19ug/mL、75.36ug/mL、8.95ug/mL和5.53ug/mL。然后,利用凹玻片法测定5种杀菌剂对番茄灰霉孢子萌发的抑制作用,其EC50依次为1665.56ug/mL、1416.16ug/mL、241.90ug/mL、37.32ug/mL和21.35ug/mL。采用盆栽实验测定5种杀菌剂的室内防治效果,其750倍液的防治效果依次为68.47%、70.14%、74.18%、74.13%和80.63%。最后,结合小区实验测定了5种杀菌剂的室外防治效果,其750倍液的防治效果依次为63.37%、64.83%、69.56%、73.49%和75.55%。解淀粉芽孢杆菌Ba168WP皿内抑菌范围较广,虽然室内毒力和田间防效对于其防治番茄灰霉病的效果不及化学药剂,但盆栽防效和田间防效分别为68.47%和63.37%,与枯草芽孢杆菌的防效相当,可以作为田间防治番茄灰霉病菌的一种辅助药剂。