肿瘤严重危害人类健康,开发新型抗肿瘤药物一直是药学工作者的研究重点之一。作为广泛发生于肿瘤中的现象,表观遗传对于恶性肿瘤异质性的形成和维持具有极其关键的作用,利用表观遗传靶点防止或抑制表观遗传调节的失衡成为了现今解决恶性肿瘤问题的一个新途径。作为表观遗传学的重要读取器,溴结构域和末端结构域（BET）蛋白家族在肿瘤的发生中发挥着重要作用。BRD4（bromodomain-containing protein 4,含溴结构域蛋白 4）是 BET 蛋白家族中研究最深入、最广泛的成员,通过与乙酰化的组蛋白赖氨酸残基相结合,从而介导了下游的染色质重塑以及转录调控等过程。研究显示,BRD4抑制剂能够抑制淋巴瘤,乳腺癌,胰腺癌,结肠癌和非小细胞肺癌等癌症的生长。目前,通过靶向BRD4已经研发出了许多抑制剂,无论是单独用药还是和其他药物联合使用都对癌症有着显著的效果。本课题基于BRD4蛋白三维空腔结构特点,以先前发现的重要化合物YHP-6为先导,通过计算机辅助药物设计,结合分子杂合等策略,设计、合成了噻吩并吡啶烷酮（系列A）,苯并噻唑烷酮（系列B）,苯并甲基异噁唑（系列C）和3,5-二甲基异噁唑（系列D）四个系列,其中,系列C有10个化合物,系列A,B,D各有4个化合物,计22个化合物。通过核磁共振氢谱（1H-NMR）、碳谱（13C-NMR）以及质谱（MS）对化合物的结构进行了鉴定。在BRD4抑制活性评价中,大多数化合物都对BRD4具有较好的抑制作用。在1 μM浓度下,化合物CL-A1和CL-C1对BRD4的抑制率与阳性对照药JQ1相当,分别为98.4%和98.2%。在对BRD4敏感的乳腺癌细胞MCF-7、非小细胞肺癌细胞A549以及结肠癌细胞HT-29的抗增殖活性试验中,多数化合物对这三株细胞的抗增殖活性都较好。其中,系列C化合物的活性最好,几乎所有的化合物都对这三株肿瘤细胞有较好的抗增殖活性且均高于阳性对照药JQ1。选取具有良好酶活和细胞活性的化合物CL-C1进行了初步的抗肿瘤作用机制研究。在划痕实验中,化合物CL-C1在5 μM浓度下,能够显著抑制肿瘤细胞的迁移,对MCF-7和A549细胞的迁移抑制率达到88%和86%。在细胞凋亡实验中,化合物CL-C1能够以浓度依赖的方式诱导MCF-7细胞凋亡。在浓度为2.5μM和5 μM时,化合物CL-C1可以将细胞周期阻滞在G0/G1期,处于G0/G1期的细胞分别从64.38%增加至78.93%和82.30%。以上结果与BRD4抑制剂的基本特征相符合。利用SwissADME进行成药性预测结果显示,化合物CL-C1符合Lipinski规则,成药性较好,可作为新型BRD4抑制剂开展进一步的抗肿瘤活性评价。