新疆核桃青皮总黄酮提取及分离纯化研究

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核桃(Juglans regia L.)属胡桃科(Juglandaceae)胡桃属(Juglans L.),在全世界均有分布。新疆是我国最早种植核桃的地区之一。核桃是世界著名的“四大坚果”之一,其果仁可生食、炒食;核桃青皮(又名青龙衣)、核桃果壳、核桃叶子可以入药,据民间记载青皮核桃泡酒有治疗胃病的功效,也有人用核桃青皮治疗癌症。核桃青皮为核桃未成熟时外部的一层厚厚的绿色果皮,目前在核桃产地,核桃果实采收后会有大量青皮堆放农场四周,青皮逐渐腐烂,变质,并产生有毒物质,严重污染环境,如果对其加以利用,不仅可以有效防止环境污染,还可以增加果农的收入。目前,针对核桃青皮有效成分综合利用方面的文献报道不多,其资源的开发利用尚存在很大潜力。本文对核桃青皮的化学成分、药理活性进行综述。为核桃青皮有毒废渣中的有效成分的开发和利用提供资料。1.本实验对核桃青皮进行超声波提取并进行含量测定。正交实验结果表明:核桃青皮总黄酮的最佳提取工艺条件为A1B3C2D3,即料液比1:12、乙醇浓度45%、超声时间是65min、超声功率120W。最终得出实验数据,各因素对总黄酮提取率的影响为:料液比>超声时间>超声次数>乙醇浓度,目前,实验室得到核桃青皮中总黄酮提取率为1.496mg·g-1。以核桃青皮为材料,用冷乙醇提取法,冷水提取法,热水提取法,乙醇回流提取法进行提取核桃青皮中的总黄酮,结果表明,乙醇回流提取法>热水提取法>冷水提取法>冷乙醇提取法。2.对核桃青皮进行进一步树脂筛选和分离纯化,并确定了最佳提取工艺条件,实验表明树脂的筛选试验证明HPD100型树脂洗脱率为80.34%,吸附量和解吸量相当高于其它五种,所以HPD100型树脂表现出最佳的综合性能正交实验表明核桃青皮总黄酮纯化的最佳提取工艺条件A2B2C1D2,吸附液pH为8、解吸液浓度60%、解吸液用量为30ml.解吸时间2.5。从实验结果可以看出,各因素对总黄酮提取率的影响主次分别为:A>B>D>C,即吸附液pH>解吸液浓度>解吸时间>解吸液用量,解吸率可达到70.12%。3.本文首次对核桃青皮中的化学成分进行系统的报道,通过预试验确定了核桃青皮中的化学成分,结果表明核桃青皮中含有糖类,分类,醌类,黄酮类,酯类,苷类,油类等,以后其中有效成分的提取,分离提供了参考,具有一定的意义。4.本文建立了核桃青皮中胡桃醌HPLC含量测定的方法,以胡桃醌为对照品,色谱柱为Waters X Terra RP18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-1%醋酸水溶液(60:40),流速为1.0mL·min-1,检测波长254nm,柱温:30℃;结果表明胡桃醌在0.0546~0.546μg/mL范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率为103.37%,RSD为1.15%;该方法简便、准确,重现性好,可为核桃青皮的质量评价提供科学依据。
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