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鹅的副粘病毒病已成为对养鹅业危害严重的传染病之一，其病原鹅副粘病毒(GPMV)，属于新城疫病毒的变异株。针对该病我国尚未有成熟的疫苗问世，对该病的预防和控制仍然是养鹅生产业的一道难题。因此，针对这一现实问题，研究安全、高效、廉价的新型疫苗对预防与控制鹅的副粘病毒病具有重要的意义。
“自杀性”DNA疫苗(Suicidal DNA vaccine)是基于常规DNA疫苗和“自主复制型”RNA疫苗(Self—replicating RNA vaccine)基础发展起来的一种全新的疫苗设计，不仅具有“自主复制型”RNA疫苗的安全性与高效性，而且结合了常规DNA疫苗易制备、保存等方面的优点，还能突破免疫耐受，堪称近年来基因疫苗发展的重大突破，具有巨大的开发潜力与良好的应用前景。作为重要的动物病毒性疾病，新城疫病的常规DNA疫苗得到了广泛开展，但“自杀性”DNA疫苗研究迄今尚未见报道。
本研究首先对华南农业大学传染病研究室分离并保存的1株鹅副粘病毒分离株61/GO/GD/05进行了主要的生物学特性研究。结果显示：该毒株的鸡胚平均死亡时间(MDT)为78h；脑内接种指数(ICPI)为1.70；静脉接种指数(IVPI)为2.34；对鸡胚的半数感染量(EID50)为10-7.43/0.2mL；对鹅的半数致死量(LD50)为10-1.93/0.5mL；致病性试验表明，该毒株对21日龄非免疫鸡和16日龄非免疫鹅都具有较强的致病性。综合各项生物学特性指标，确定该毒株为强毒力GPMV毒株。
利用自行设计的引物成功对61/GO/GD/05毒株的F基因进行核苷酸序列扩增，并对其3’末端375bp的核苷酸序列进行相似性分析和基因分型。结果表明该毒株为基因Ⅶ型，属于我国目前流行的NDV主型基因型毒株。61/GO/GD/05 F蛋白裂解位点区(112—117)氨基酸的序列分析结果为RRQKRF，符合NDV强毒株的氨基酸序列特征。
基于F基因的核苷酸序列的相似性比较结果显示，61/GO/GD/05毒株与GenBank中的我国早期分离GPMV SF02和ZJ1毒株相似性最高，分别为98.3％和98.0％；与Clone30的相似性最低，为84.2％；与F48E9毒株的相似性为86.6％。基于F基因的遗传进化分析结果显示该毒株与SF02的亲缘关系最近，与Clone30株的F基因亲缘关系最远。基于HN基因的核苷酸序列的相似性比较结果显示与SF02和ZJ1的相似性最高，分别为98.4％和98.3％，与Clone30的相似性最低为82.2％，与F48E9的相似性为84.6％。HN基因的遗传进化分析表明，61/GO/GD/05分离株与SF02和ZJ1有较近的亲缘关系，与Clonr30株的亲缘关系最远。
本研究将61/GO/GD/05分离株的HN基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1+和“自杀性”表达载体pSCA1中，构建了可作为常规DNA疫苗的表达质粒pcHN和“自杀性”DNA疫苗表达质粒pSHN，经转染BHK—21细胞，用间接免疫荧光技术检测到目的蛋白的表达。结果表明所构建的2种表达载体HN基因都获得了正确表达。将pSHN以150μg/只免疫非免疫鹅，并与相同剂量的常规DNA疫苗(pcHN)免疫组进行比较，结果表明常规DNA疫苗免疫组产生的HI抗体低于“自杀性”DNA疫苗免疫组。二免后攻毒实验结果表明“自杀性”DNA疫苗与常规DNA疫苗的保护率分别为60％和50％，“自杀性”DNA疫苗的免疫保护效果要优于常规DNA疫苗。本实验为探索GPMV新型疫苗奠定了基础。