番鸭呼肠孤病毒病是由番鸭呼肠孤病毒(Muscovy duck reovirus，MDRV)感染引起的番鸭的一种高发病率、高致死率的传染病。该病多发于雏番鸭，是危害番鸭养殖业的主要传染病之一，该病在广东地区番鸭养殖业中造成的经济损失也较大。 为有效防制该病，本研究从广东清远某鸭场疑似该病的番鸭病料中分离到一株病毒，通过生物学特性试验和保守基因克隆及序列分析对其进行鉴定。结果该病毒能够引起番鸭胚、白鸭胚、鸡胚的死亡，造成胚体的全身点状出血；用病毒对2d的番鸭、白鸭和鸡进行致病性试验，结果仅有番鸭在5d左右开始大量发病死亡，剖检可见发病番鸭的肝脏和脾脏上有大量的白色坏死灶，而白鸭和鸡均未发现临床症状和病理变化；该病毒能够在鸡胚成纤维细胞、番鸭胚成纤维细胞、鸭胚成纤维细胞上生长，并产生细胞病变，而不能在哺乳动物细胞上生长；针对MDRV的保守基因设计引物，采用RT-PCR方法，从该株病毒细胞培养物中扩增出671bp左右的目的条带，经克隆测序后表明它与MDRV P10基因序列和MDRVσC基因相似性最高。以上结果综合表明，本研究分离的病毒为MDRV，将其命名为MDRV—QY株。 在上述试验基础上，为探讨MDRV的免疫原基因，并为其与番鸭IL-18基因构建共表达重组核酸疫苗，本研究克隆了MDRV—QY株、MDRV—SC株、和MDRV—FJ株S基因组中的σA基因、σNS基因和σC基因。结果克隆三株病毒的σA基因全长为1124bp，σNS基因全长为1191bp，σC基因全长为843bp。通过所克隆病毒基因序列分析，发现三株病毒的各个基因与国内外的大部分MDRV毒株有较高的相似性；三个毒株之间，同为广东分离株的MDRV—QY株、MDRV—SC株相似性较高：本研究克隆的番鸭IL-18基因，其长度为608bp，其中ORF为603bp，编码201个氨基酸，分子量大小23.13kDa。将所得番鸭IL-18基因与GenBank上8个参考序列进行核苷酸相似性比较，发现与其相似性最低的是鸡的IL-18基因，相似性最高的是鸭的IL-18基因。 接着将分离MDRV—QY株的σC基因和番鸭IL-18的基因分别与真核表达载体pIRES连接，构建pIRES—σC—IL-18真核共表达质粒，将所构建的pIRES—σC—IL-18质粒转染293细胞，48h后收集pIRES—σC—IL-18转染293细胞后的细胞破碎液进行SDS-PAGE、Western—blotting鉴定，出现约23kDa和29kDa的特异反应条带。其表明pIRES—σC—IL-18在293细胞中成功表达具有抗原特异性的MDRV—σC蛋白和番鸭IL-18蛋白。用重组真核表达质粒pIRES—σC—IL-18作DNA疫苗进行初步雏番鸭的免疫保护试验，结果获得3/10的免疫保护。 综上，本研究为进一步研制MDRV的免疫诊断试剂和基因疫苗打下了一定的基础，获得了初步的经验。