【摘 要】
：
目的:研究骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSC）对哮喘小鼠气道重塑和气道炎症的影响,并进一步探讨其机制,为MSC在治疗支气管哮喘中的作用奠定理论基础。方法:（1）从BALB/c小鼠骨髓分离、培养并鉴定MSC和树突状细胞（dendritic cells,DC）。（2）采用卵清蛋白（ovalbumin,OVA）致敏和激发的方法构建哮喘小鼠模型。经小鼠尾静脉注射MSC。
【基金项目】
：
国家自然科学基金项目（81300018）；
论文部分内容阅读
目的:研究骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSC）对哮喘小鼠气道重塑和气道炎症的影响,并进一步探讨其机制,为MSC在治疗支气管哮喘中的作用奠定理论基础。方法:（1）从BALB/c小鼠骨髓分离、培养并鉴定MSC和树突状细胞（dendritic cells,DC）。（2）采用卵清蛋白（ovalbumin,OVA）致敏和激发的方法构建哮喘小鼠模型。经小鼠尾静脉注射MSC。小鼠随机分组:PBS组、PBS+MSC组、哮喘组和哮喘+MSC组。行各组小鼠肺组织HE染色和PAS染色、小鼠肺泡灌洗液细胞分类和计数,ELISA法检测血清及肺泡灌洗液中白介素-10（IL-10）、白介素-12（IL-12）及半乳凝集素-1（Galectin-1,Gal-1）水平,观察MSC对哮喘小鼠气道炎症的影响。Real-time PCR和Western blot方法检测肺组织中Gal-1蛋白水平表达的差异。（3）体外实验中,MSC与DC共培养,流式细胞仪检测MSC对DC表型的影响,ELISA检测细胞共培养上清液中IL-10、IL-12及Gal-1水平,混合淋巴细胞反应法测定MSC对DC增殖活性的影响。（4）在MSC与DC共培养体系中加入Gal-1抑制剂IPTG,流式细胞仪检测MSC对DC表型的影响,ELISA检测上清液中IL-10、IL-12及Gal-1水平,混合淋巴细胞反应法测定MSC对DC增殖活性的影响,Real-time PCR和Western blot方法检测DC中Gal-1蛋白水平表达的差异。免疫荧光法检测各组DC表面Gal-1蛋白表达的差异。（5）检测DC中MAPK信号通路ERK、p38 MAPK、JNK分子的磷酸化水平,进一步用相应的ERK抑制剂PD98059、p38 MAPK抑制剂SB203580和JNK抑制剂SP600125抑制DC中的MAPK信号通路,观察Gal-1的表达。结果:（1）骨髓MSC可减轻哮喘小鼠气道炎症,改善气道重塑,同时发现小鼠血清及肺泡灌洗液中IL-10、IL-12及Gal-1水平增高,肺组织中Gal-1蛋白表达增强。（2）在体外MSC与DC共培养后发现,MSC可下调DC表面CD 80、CD 86、CD83、MHCII等分子的表达,从而抑制DC对同种异体T细胞的增殖活性。且随着共培养体系中MSC浓度的增加,细胞培养上清液中IL-10、IL-12及Gal-1的水平也增高。（3）在MSC与DC共培养体系中加入Gal-1抑制剂IPTG,其DC表面共刺激分子的表达较MSC+DC和Gal-1+DC组而增高,对同种异体T细胞的增殖作用增强,共培养体系中IL-10、IL-12的水平也降低,提示MSC可能通过分泌Gal-1发挥其作用。同时还发现MSC能促进DC中Gal-1的表达。（4）Gal-1可激活DC中的ERK途径,阻断p38 MAPK途径。加入Gal-1抑制剂IPTG后,则出现相反结果。应用MAPK抑制剂证实,Gal-1抑制DC功能是通过MAPK途径实现的。结论:骨髓MSC可减轻哮喘小鼠气道炎症,改善气道重塑,这一作用可能是通过分泌Galectin-1实现的,后者通过激活DC中的ERK通路、抑制p38 MAPK通路,同时使IL-12和IL-10水平均升高,从而赋予DC致耐受性潜能,抑制了T细胞的增殖与活化,进而发挥抑制哮喘气道炎症反应的作用。
其他文献
被子植物的花器官由花分生组织发育而来,不同物种花器官的数目、排列、形状和大小有所不同,决定了花形态的多样性。花器官的数目是由花分生组织的大小决定的,当花器官原基在正确的位置起始,A、B、C、D和E类花同源异型基因决定花器官的属性。然后花器官通过细胞分裂和细胞扩张两个连续的过程生长到特有的大小。在器官发生时,原基和周围组织之间会产生边界,边界的形成对维持器官正常的形态建成具有非常重要的作用。边界细胞
背景:膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一,在我国的发病率逐年上升,非肌层浸润性膀胱癌复发率近50%,肌层浸润性膀胱癌5年生存率不足一半,且数十年来,膀胱癌的预后没有明显的改善,迫切需要更全面深入的肿瘤分子生物学研究,为临床治疗提供新的思路。前期我们在大鼠原位膀胱癌模型中利用基因芯片筛选出了差异基因,其中JNK2在不同肿瘤中有促癌或抑制的作用,而膀胱癌中尚无相关研究。目的:探索JNK2蛋白在膀胱肿
本文立足北京城市地下管线管理现状，运用SWOT分析法分析当前地下管线管理中面临的机遇挑战，存在的优势劣势，并提出机遇挑战是相对稳定的因素，优势积累和保持需要政策、管理、技术、资金的有效投入，劣势是影响管理效能的最大变量，应突出安全发展，优化顶层设计，强化系统管理，推动数字化转型，补齐劣势短板，提升地下管线精细化管理水平。
海绵城市建设是城市发展的新理念，是生态发展的新模式。面对目前城市内涝多发的严峻形势，科学建设海绵城市显得尤为重要。技术标准化是当前我国海绵城市建设的迫切需求，按照国家标准、行业标准及地方标准等不同层次分析海绵城市建设技术标准现状。基于海绵城市建设领域长期的研究和实践剖析其技术标准化的现存问题，着重阐述海绵城市的基本概念与发展、相关行业标准规范补充修订对海绵城市的影响，以及综合标准的构建与各子标准之
粘蛋白型O-糖基化又称为蛋白质O-Gal NAc糖基化,是一种常见的蛋白质翻译后修饰,参与了众多生理和病理过程。研究蛋白质O-Gal NAc糖基化调控机制对理解和解析粘蛋白型O-糖链及糖蛋白在生命活动中的功能作用具有重要意义。多肽:N-乙酰氨基半乳糖基转移酶（UDP-Gal NAc:polypeptide N-acetylgalactosaminyltransferase;pp Gal NAc-T
背景结直肠恶性肿瘤一直是全球常见主要消化道肿瘤之一,发病率和死亡率居高不下。微卫星不稳定（Microsatellite instability,MSI）是目前结直肠肿瘤中研究相对深入的一种现象。尚未有系统性生物信息学研究分析不同MSI状态结直肠癌的生物学以及相关肿瘤免疫等特征。方法本文通过分析差异基因集、蛋白质互作网络构建、基因表达富集分析（Gene Set Enrichment Analysis
肿瘤起始细胞（Tumor initiating cells,TICs）是导致肿瘤发生、化疗耐药和肿瘤复发的根本原因。多项研究报道化疗导致肿瘤组织中TICs富集的现象,但TICs如何被药物调控仍是肿瘤研究领域尚未解决的核心问题。黏蛋白1（mucin1,MUC1）在多种肿瘤组织中异常表达且与肿瘤的恶性程度及不良预后相关。课题组前期研究发现MUC1高表达导致细胞获得性耐药,但MUC1对化疗后TICs的调
【目的】本研究通过对野生型小鼠和法尼酯衍生物X受体（farnesoid X receptor,FXR）敲除小鼠同时建立肾脏缺血再灌注损伤（Ischemia-reperfusion injury,IR）模型,探讨FXR在肾脏IR损伤中的作用及机制,并通过对人肾小管上皮细胞（Human Kidney-2,HK-2）建立缺氧复氧模型验证FXR的作用及分子机制,以探讨急性肾损伤的发生机制并提供新的治疗靶点
研究目的IPO-38/组蛋白是本课题组前期研究发现的胃癌新型血清标志物,将实验室研究成果转化成临床可用的诊断方法尚需要几个关键技术环节上的突破,其中就包括高纯度抗原的确立、可识别两种抗原表位的抗体、临床实用且敏感性较高的诊断方法选择等。本研究将围绕上述关键问题展开,包括组蛋白抗原的蛋白质修饰鉴定、蛋白质修饰的可能调控机制、临床实用诊断方法的选择以及方法学建立等,旨在促进实验室研究成果的早日临床转化
目的婴幼儿血管瘤通常被认为是以大量幼稚血管内皮细胞增殖为特征的血管来源良性肿瘤,其具有富血管、能自身消退并在退化后形成脂肪纤维组织的临床特征,对于婴幼儿血管瘤发病机制的研究将为其临床治疗和应用提供新的思路。增生期婴幼儿血管瘤组织中CD133阳性的血管瘤干细胞,因其能构建血管瘤动物模型而成为血管瘤研究的焦点。因此,本研究通过对血管瘤干细胞的细胞生物学特征的探索,以解析婴幼儿血管瘤可能的发病机制,为其