【摘 要】
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目的:通过建立湿热证大肠癌小鼠模型,探讨健脾清热除湿法（复方中药）对湿热证大肠癌荷瘤小鼠抗肿瘤作用和肠道菌群影响的研究,揭示其可能的抗肿瘤机制,为临床用药提供科学依据。方法:1)分组:选取40只4-6周龄的BALB/c雄鼠,适应性喂养7日后,将小鼠随机分成5组,分别为空白组（Con组）、模型组（Model组）、中药高（ZQYJ-H组）、中药中（ZQYJ-M组）、中药低剂量组（ZQYJ-L组）,每组
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目的:通过建立湿热证大肠癌小鼠模型,探讨健脾清热除湿法（复方中药）对湿热证大肠癌荷瘤小鼠抗肿瘤作用和肠道菌群影响的研究,揭示其可能的抗肿瘤机制,为临床用药提供科学依据。方法:1)分组:选取40只4-6周龄的BALB/c雄鼠,适应性喂养7日后,将小鼠随机分成5组,分别为空白组（Con组）、模型组（Model组）、中药高（ZQYJ-H组）、中药中（ZQYJ-M组）、中药低剂量组（ZQYJ-L组）,每组各8只。2)造模:模型组及中药组小鼠予以蜂蜜水（0.2G/m L）喂养,并予以北京红星二锅头酒（52°）0.1m L+猪肉脂肪0.1m L灌胃7天,建立湿热模型。造模成功后进行大肠癌细胞皮下注射造模。3)给药:皮下肿瘤长出后,中药高、中、低组分别予以高（10g/kg）、中（5 g/kg）、低（2.5g/kg）剂量ZQYJ（贞芪六君抑癌汤合一加减正气散）灌胃（0.4m L）,Con组、Model组用生理盐水灌胃（0.4m L）,服用药物21天后处死小鼠。4)记录:记录小鼠体重波动、精神状况、粪便多少和性状。5)检测:处死小鼠后观察肿瘤大小、肿瘤病理组织变化,采用蛋白免疫印迹法检测AKT、PI3K、Bcl2、Caspase3蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应检测AKT、PI3K、Bcl2、Caspase3 m RNA表达,16Sr RNA测序检测肠道菌群。结果:1)给药期间,中药组小鼠一般情况较空白组和模型组好转。与模型组相比,中药高、中剂量组小鼠体质量增加（P＜0.05）。与空白组和模型组相比,中药组肿瘤生长缓慢,体积较小（P＜0.05）。与空白组相比,中药高、中组小鼠皮下肿瘤重量均减轻（P＜0.05）,模型组、中药低剂量组皮下肿瘤重量减轻不明显（P＞0.05）。与模型组相比,中药高、中剂量组皮下肿瘤重量减轻（P＜0.05）,中药低剂量组和模型组皮下肿瘤重量无差异（P＞0.05）。中药高剂量组抑瘤率为44.42%,中药中剂量组抑瘤率为26.34%,中药低剂量组抑瘤率为13.83%。空白组、模型组肿瘤组织坏死极少,与这两组相比,中药组坏死增多。高剂量组肿瘤组织坏死最为严重,中剂量组次之,低剂量组坏死最少。2)AKT、PI3K、Bcl2、Caspase3蛋白表达情况:各组中AKT蛋白表达无差异（P＞0.05）;中药高、中剂量组PI3K蛋白表达低于空白组和模型组（P＜0.05）;中药高、中、低剂量组Bcl2蛋白表达低于空白组和模型组（P＜0.05）;中药高、中剂量组Caspase3蛋白表达高于空白组和模型组（P＜0.05）。3)AKT、PI3K、Bcl2、Caspase3 m RNA表达情况:中药高、中剂量组AKT1 m RNA表达低于空白组（P＜0.05）,中药高、中、低剂量组AKT1 m RNA表达低于模型组（P＜0.05）;中药高、中剂量组PI3K m RNA表达低于空白组和模型组（P＜0.05）;中药高、中剂量组Bcl2 m RNA表达低于空白组和模型组（P＜0.05）;中药高、中剂量组Caspase3 m RNA表达高于空白组和模型组（P＜0.05）,中药低剂量组Caspase3 m RNA表达高于空白组（P＜0.05）。4)贞芪六君抑癌汤合一加减正气散可以改变荷瘤小鼠肠道菌群,增加大肠癌荷瘤小鼠肠道菌群中乳杆菌科和毛螺菌科数目,减少鼠杆菌科、葡萄球菌科数目,促进湿热证大肠癌荷瘤小鼠肠道普雷沃氏菌、乳杆菌科生长,抑制葡萄球菌科生长。结论:1)贞芪六君抑癌汤合一加减正气散可增加荷瘤小鼠体重,改善荷瘤小鼠精神状态,减轻皮下瘤重量,促进大肠癌肿瘤组织坏死。2)贞芪六君抑癌汤合一加减正气散可能通过抑制PI3K/AKT通路,发挥抗肿瘤作用。3)贞芪六君抑癌汤合一加减正气散可改变荷瘤小鼠肠道菌群,促进益生菌生长。
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