【摘 要】
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油菜是我国种植面积最大的油料作物。甘蓝型油菜叶片、茎秆、角果表面覆盖有一层蜡粉,是油菜抵御干旱和低温等外界环境的第一道屏障,是油菜适应外界环境,长期选择与进化的结果。在育种材料中发现了一株无蜡粉株gly,经连续自交后,选择纯合无蜡粉亲本与有蜡粉亲本中双11杂交获得F1,F1自交获得F2群体。根据分离表现对无蜡粉性状进行了遗传分析,并利用全基因组重测序(BSA-seq)对无蜡粉性状进行了基因初定位,
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油菜是我国种植面积最大的油料作物。甘蓝型油菜叶片、茎秆、角果表面覆盖有一层蜡粉,是油菜抵御干旱和低温等外界环境的第一道屏障,是油菜适应外界环境,长期选择与进化的结果。在育种材料中发现了一株无蜡粉株gly,经连续自交后,选择纯合无蜡粉亲本与有蜡粉亲本中双11杂交获得F1,F1自交获得F2群体。根据分离表现对无蜡粉性状进行了遗传分析,并利用全基因组重测序(BSA-seq)对无蜡粉性状进行了基因初定位,同时利用转录组测序RNA-seq对两个亲本,F2有蜡粉混样和无蜡粉混样以及杂合无蜡粉单株连续自交分离后代F7群体有蜡粉单株与无蜡粉单株进行转录组分析,结合遗传标记和连锁分析等技术进行了基因定位分析,研究结果如下:1.根据无蜡粉株自交分离的纯合无蜡粉单株与有蜡粉品种中双11正反交F1及F2分离表现,经卡方分析表明该甘蓝型无蜡粉株gly的无蜡粉性状为单基因显性遗传,且无细胞质效应。2.利用BSA-seq技术将无蜡粉基因BnaC.GL定位在甘蓝型油菜C08染色体36.48~37.54Mb之间的1.06Mb区间内,区间内有候选基因192个。3.在候选区间设计了 SSR引物113个和InDel引物235个,并筛选出紧密连锁的标记7个,利用gly纯合无蜡粉亲本×中双11构建的F2大群体隐性单株进行交换单株分析,将对无蜡粉基因BnaC.GL定位在标记IN121和SSR-2-304之间,该区间含候选基因10个。4.对有蜡粉无蜡粉亲本、F2和近等基因系中无蜡粉和有蜡粉株进行转录组分析,得到1个共同的差异表达基因BnaC08g43810D,该基因位于连锁区间内。利用近等基因系有蜡粉和无蜡粉植株叶片对候选基因BnaC08g43810D进行了 qPCR验证,BnaC08g43810D在近等基因系叶片差异表达结果与转录组分析一致,且在近等基因系的有蜡粉和无蜡粉株荚果皮之间表达也有显著差异,确定BnaC08g43810D为候选基因。
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