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研究目的:印记基因对于细胞代谢调节、胎儿生长发育、干细胞分化具有重要的作用。骨损伤愈合是局部骨再发育并涉及多因素高度复杂的生物学过程。骨损伤修复与印记基因以及micro RNA之间关系的研究很少。本研究通过检测H19、miR-675、Grb10在骨愈合过程中的表达变化,探讨骨愈合相关细胞和印记基因和微小RNA的关系。研究方法:30只大鼠左后肢股骨骨缺损造模,右后肢股骨假手术,分别于5d、10d、15d、20d、25d断颈法处死,每个时间点取6只,取左右后肢股骨分别作为实验组和对照组,常规包埋,固定,切片。采用免疫组化染色观察Grb10蛋白的表达;采用免疫印迹测定Grb10蛋白表达;采用实时荧光定量PCR测定H19、Grb10、miR-675的表达。研究结果:免疫组化染色结果发现:Grb10蛋白在实验组5d和10d骨损伤愈合部位的表达量升高,平均光密度值显示实验组5d和10d蛋白表达量是对照组的两倍。实时荧光定量PCR结果发现:H19、Grb10、miR-675在5d到25d实验组和对照组中均有表达;损伤后5d,实验组H19表达量是对照组的两倍,损伤后10d,实验组H19表达量也是对照组的两倍;损伤后15d、20d、25d实验组和对照组的表达量基本持平;所有对照组miR-675表达基本一致,损伤后5d,实验组miR-675表达量是对照组的2.5倍,损伤后10d,实验组miR-675表达量升高,是对照组的3倍;15d、20d、25d、实验组和对照组的表达量基本持平;损伤后5d实验组Grb10的表达量是对照组的3倍,损伤后10d实验组表达量下降,与对照组相比,是对照组的三倍。免疫印迹结果发现:Grb10蛋白在损伤后5d表达量比对照组表达量升高了两倍,10d实验组蛋白表达量下降,相对于对照组也升高了约两倍,15d、20d、25d实验组和对照组蛋白含量基本一致。研究结论:1)H19、Grb10和miR-675促进骨细胞的增殖与分化,加速损伤的愈合进程。