【摘 要】
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目的研究细胞色素P450芳香化酶在大鼠多囊卵巢颗粒细胞中的表达水平,探讨细胞色素P450芳香化酶与多囊卵巢综合征发生、发展的关系,为进一步阐明PCOS的发病机制提供理论依据。方
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目的研究细胞色素P450芳香化酶在大鼠多囊卵巢颗粒细胞中的表达水平,探讨细胞色素P450芳香化酶与多囊卵巢综合征发生、发展的关系,为进一步阐明PCOS的发病机制提供理论依据。方法采用孕激素联合HCG法建立多囊卵巢综合征大鼠模型。(1)运用化学发光免疫方法测定大鼠血清中睾酮(T)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)的含量;(2)运用T/A克隆将RT-PCR扩增片段连接载体,并进行测序分析。(3)应用半定量RT-PCR检测PCOS组及正常组大鼠卵巢组织中细胞色素P450芳香化酶基因(CYP19)的表达水平;(4)采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法对大鼠卵巢组织中细胞色素P450芳香化酶进行检测;结果(1)PCOS组血清中T、FSH含量较正常组升高;(2)RT-PCR扩增产物经测序分析,结果与GeneBank中CYP19cDNA序列比对,完全一致。(3)PCOS组和正常组卵巢组织中CYP19基因表达水平,经半定量分析,相对表达强度分别为(0.138±0.072)和(0.759±0.236),差别有显著性意义(P<0.01);(4)免疫组化结果:模型组与正常组之间比较,原始卵泡、初级卵泡和成熟卵泡细胞色素P450芳香化酶蛋白表达下降(P<0.05)。模型组各级卵泡间比较表达无显著性差异,在正常对照组内,初级卵泡、次级卵泡和成熟卵泡比较,芳香化酶蛋白表达有显著性差异(P<0.05)结论细胞色素P450芳香化酶mRNA在PCOS大鼠卵巢组织中呈低表达;细胞色素P450芳香化酶蛋白在PCOS大鼠卵巢初级卵泡和成熟卵泡中表达下降;多囊卵巢综合征的发生可能与细胞色素P450芳香化酶在mRNA和蛋白水平的表达下调有关。
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