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目的:研究激动多巴胺D2样受体对星形胶质细胞自噬和神经炎症的调控的作用和分子机制。方法:以野生型和DRD3受体敲除小鼠皮层原代星形胶质细胞为研究对象,多巴胺D2样受体激动剂普拉克索(Pramipexole,PPX)或喹吡罗(Quinpirole)为工具药。Q-PCR检测星形胶质细胞DRD2受体和DRD3受体转录水平。CCK8检测细胞活力。采用Q-PCR方法检测促炎症因子肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)及诱导型氮氧化物合酶(Inducible nitric oxide synthase,iNOS)mRNA 水平。然后,分别在正常星形胶质细胞、氯喹(Chloroquine,CQ)抑制自噬后的细胞以及DRD3受体缺失的星形胶质细胞上,给予LPS预处理5 h,PPX共处理1小时(hour,h),最后加入三磷酸腺苷(Adenosine triphophate,ATP)共同刺激细胞30分钟(minute,min),采用Western Blot检测细胞上清及胞内炎症蛋白IL-1β、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1)含量变化,采用ELISA检测上清中IL-1β含量。Western Blot方法检测星形胶质细胞自噬相关蛋白表达和调控信号分子磷酸化变化。转染GFP-LC3质粒,激光共聚焦观察细胞内GFP-LC3点状聚集体数目改变。结果:星形胶质细胞表达DRD2和DRD3受体,DRD3受体mRNA水平约是DRD2受体的2倍。DRD2受体激动剂Quinpirole在200 μM内不影响细胞活力,DRD3受体激动剂PPX在800 μM内对细胞无影响。与LPS组相比,DRD2受体激动剂Quinpirole在一定剂量(10-100 μM)范围内抑制LPS引起的促炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6及iNOS转录水平的增加,该剂量范围内不具有浓度依赖性。DRD3受体激动剂PPX在一定剂量(100-400 μM)范围内不能抑制LPS诱导的促炎症因子TNF-α、IL-1β的转录增加。与溶剂对照组相比,在一定剂量(50-200μM)范围内PPX能够抑制LPS+ATP诱导的星形胶质细胞上清中IL-1β和caspase-1成熟体表达及释放,且呈浓度依赖性下降,具有浓度依赖性。敲除DRD3受体或CQ(40μM)完全抑制自噬后,与单独给予LPS+ATP组相比,PPX(50-200μM)抑制炎症蛋白IL-1β、caspase-1成熟和释放的作用消失。与对照组相比,DRD2受体激动剂Quinpirole在一定剂量(10-200 μM)和时间(1-12 h)范围内未观察到细胞自噬蛋白LC3-Ⅱ和BECN 1变化。与对照组相比DRD3受体激动剂PPX在一定剂量范围内呈时间(1.5-24 h)和剂量(100-400 μM)依赖性促进星形胶质细胞内LC3-Ⅱ和BECN 1蛋白增加。PPX不改变星形胶质细胞哺乳类雷帕霉素靶位(S2248)(mTOR(S2248))及 Unc-51 样激酶 1(S555)(ULKI(S555))磷酸化水平,提示 mTOR信号通路不参与PPX对星形胶质细胞自噬活性的调控。激光共聚焦观察到PPX处理12 h,胞内GFP-LC3点状聚集明显增加。说明DRD3受体激动和自噬活性增加介导了 PPX对炎症小体的抑制。结论:多巴胺D2样受体激动剂Quinpirole与PPX通过不同机制调控炎症反应。选择性DRD2受体激动剂Quinpirole抑制促炎细胞因子转录,而DRD3受体激动剂PPX不影响促炎细胞因子转录,但通过DRD3受体增加星形胶质细胞自噬活性,抑制炎症小体蛋白caspase-1活化,从而减少了 IL-1β成熟与释放。