多肽SIKVAV修饰的壳聚糖水凝胶在皮肤创伤修复中的研究

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本文主要从以下几方面展开论述:
  一、多肽SIKVAV对成纤维细胞增殖、迁移、生长因子分泌以及胶原蛋白合成的影响
  目的:
  探讨多肽SIKVAV是否促进真皮成纤维细胞增殖、迁移、生长因子分泌以及胶原蛋白合成。
  方法:
  采用胰酶消化和组织块贴壁法获得原代成纤维细胞;CCK-8检测多肽SIKVAV对成纤维细胞增殖的影响;Transwell实验观察多肽SIKVAV对成纤维细胞纵向迁移的影响;划痕实验检验多肽SIKVAV对成纤维细胞横向迁移的影响;ELISAS检测多肽SIKVAV对成纤维细胞生长因子分泌以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白合成的影响。
  结果:
  CCK-8结果表明多肽SIKVAV促进成纤维细胞增殖(P<0.05);Transwell结果证实多肽SKIVAV促进成纤维细胞纵向迁移(P<0.05);划痕实验结果发现多肽SDIVAV促进成纤维细胞横向迁移(P<0.05);而ELISAS结果显示多肽SKIVAV促进成纤维细胞分泌EGF,bFGF,TGF-β1,VEGF以及合成Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白(P<0.05)。以上结果均呈现浓度依赖性。
  结论:
  多肽SIKVAV促进成纤维细胞增殖、横向与纵向迁移、生长因子分泌和胶原蛋白合成,表明多肽SIKVAV可通过促进成纤维细胞生物活性来参与皮肤创伤修复。
  二、多肽SIKVAV修饰的壳聚糖水凝胶在皮肤创面再上皮化、血管增生、胶原沉积以及炎症反应中的作用
  目的:
  探讨多肽SIKVAV修饰的壳聚糖水凝胶是否促进皮肤创面再上皮化、血管增生、胶原沉积以及抑制炎症反应。
  方法:
  壳聚糖水凝胶和多肽SIKVAV修饰的壳聚糖水凝胶制备和表征:小鼠皮肤创伤模型建立后,随机分空白组、多肽SIKVAV组、壳聚糖组和多肽SIKVAV+壳聚糖组;观察皮肤愈合情况并统计伤口剩余面积;HE染色检测伤口再上皮化效果;Masson三色染色判断伤口胶原纤维增生情况;免疫组化标记伤口α-SMA,CD31,F4/80,CD86,CD163,K6和K1表达。
  结果:
  合成的水凝胶具有一定的硬度,扫描电镜观察水凝胶孔径均匀,氢谱结构表征证实多肽SIKVAV连接到壳聚糖上;多肽SIKVAV+壳聚糖组创面愈合效果优于其他组,而伤口剩余面积小于其他组(P<0.05);HE染色结果表明多肽SIKVAV+壳聚糖组创面角质形成细胞迁移距离多于其他组(P<0.05);Masson三色染色结果发现多肽SIKVAV+壳聚糖组创面胶原沉积比其他组多;免疫组化结果显示,多肽SIKVAV+壳聚糖组创面α-SMA表达高于其他组(P<0.05),血管增生效果优于其他组(P<0.01),K6和K1表达量均多于其他组(P<0.05),F4/80阳性细胞和CD86阳性数比其他组均要少(P<0.05),而CD163阳性细胞较其他三组多(P<0.05)。
  结论:
  多肽SIKVAV修饰的壳聚糖水凝胶促进伤口收缩,促进角质形成细胞增值、迁移和分化,促进血管增生和胶原沉积,同时抑制炎症反应。这种水凝胶可作为合成材料应用于皮肤创伤修复,为临床创伤敷料研究提供新的理论依据。
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