【摘 要】
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目的:探究泛素水解酶22（Ubiquitin specific peptidase 22,USP22）通过细胞外信号调节激酶5（Extracellular signal regulated kinase 5,ERK5）信号通路抑制舌鳞癌细胞迁移和侵袭的分子机制。方法:1.收集自2014年2月至2019年7月收入我科的21例舌鳞癌患者,收集患者的肿瘤组织和癌旁组织,进行HE染色。2.应用免疫组织化学
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目的:探究泛素水解酶22（Ubiquitin specific peptidase 22,USP22）通过细胞外信号调节激酶5（Extracellular signal regulated kinase 5,ERK5）信号通路抑制舌鳞癌细胞迁移和侵袭的分子机制。方法:1.收集自2014年2月至2019年7月收入我科的21例舌鳞癌患者,收集患者的肿瘤组织和癌旁组织,进行HE染色。2.应用免疫组织化学染色检测USP-22基因和ERK5在肿瘤组织和癌旁组织中的表达差异。3.应用si RNA干扰,构建USP-22基因的si RNA沉默质粒,通过慢病毒转染人舌鳞癌细胞系TCA8113细胞及Tb细胞,根据是否转染si RNA-USP22质粒,将细胞分成对照组,空载体组和干扰组。4.应用RT-PCR和免疫荧光法检测USP-22和ERK5的表达。5.应用细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭水平。结果:1.HE染色结果显示,癌旁组织未见癌累及。高分化舌鳞癌组织可见癌巢及角化珠,癌巢与周围组织界限清楚,分化较好。中低分化舌鳞癌组织细胞分化程度较低。2.免疫组织化学染色和Western blot法检测结果显示,高分化舌鳞癌组织中USP-22和ERK5的表达高于癌旁组织（P＜0.05）,中低分化舌鳞癌组织中USP-22和ERK5的表达高于高分化舌鳞癌组织（P＜0.05）。3.慢病毒介导si RNA-USP22质粒转染细胞结果显示,TCA8113细胞慢病毒转染效率高于95%,Tb细胞慢病毒转染效率高于90%。4.RT-PCR结果显示si RNA-USP22可以抑制USP-22和ERK5的表达,而ERK5特异性抑制剂BIX02188不能抑制USP-22的表达,仅可以抑制ERK5表达,结果说明,ERK5可能是USP-22基因的下游靶向因子。5.免疫荧光染色结果显示,对照组和空载体组TCA8113细胞和Tb细胞中USP-22和ERK5表达量无统计学差异（P＞0.05）,干扰组TCA8113细胞和Tb细胞中USP-22和ERK5表达量均明显低于对照组和空载体组（P＜0.05）。6.细胞划痕实验和Transwell实验结果显示,si RNA-USP22干扰组TCA8113细胞和Tb细胞中细胞的迁移和侵袭能力均明显低于对照组和空载体组（P＜0.05）。结论:USP-22可以通过ERK5信号通路抑制舌鳞癌细胞的迁移和侵袭,si RNA-USP22可以有效抑制人舌鳞癌细胞的迁移和侵袭能力。
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